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1、microRNAs (miRNAs)是一類長(zhǎng)為22nt左右的非編碼RNA分子,對(duì)生物體的生理功能具有廣泛的內(nèi)源性調(diào)節(jié)作用。miRNA功能探索和表達(dá)分析在模式生物中迅速地進(jìn)行,miRNA的研究已成為當(dāng)前生物學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題,它們不但在胚胎發(fā)育時(shí)期表達(dá),在成體中也存在不同的表達(dá)情況。鹽酸克倫特羅作為β-興奮劑的一種,在用于改善豬肉品質(zhì)時(shí)有害于人的健康,間接或直接影響到了一些基因從而很大程度上提高了瘦肉率、降低了脂肪率,因此本研究用鹽酸克倫特
2、羅處理的香豬肌肉組織研究幾種microRNA的差異表達(dá)并期望與靶基因建立聯(lián)系。
本實(shí)驗(yàn)首先運(yùn)用northern bolt方法證明豬骨骼肌中存在miR-1 、miR-133、miR-206、miR-29a、miR-29b、miR-181a、miR-193、miR-195、miR-196a、let-7a、let-7b、miR-26a、miR-30d等13類microRNAs,其中miR-1、miR-133、miR-206的雜交
3、條帶明顯,miR-181a、miR-193、miR-195等雜交條帶很微弱;然后利用real-time PCR方法檢測(cè)這幾種microRNA在骨骼肌組織中的表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn):
1.miR-1、miR-133、miR-206的表達(dá)量遠(yuǎn)高于其他的microRNA,但是在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間表達(dá)沒有差異。
2.let-7a、miR-26a在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間表達(dá)差異不明顯,但是都表現(xiàn)出隨個(gè)體月齡增長(zhǎng)表達(dá)下降的趨勢(shì)。
4、
3.miR-181a、miR-193、miR-195、miR-196a、miR-30d、let-7b的表達(dá)不具有明顯的規(guī)律性。
4.miR-29a、miR-29b在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間表達(dá)差異顯著,且呈相反的規(guī)律,即個(gè)體中miR-29a、miR-29b的表達(dá)情況恰好相反。
5.根據(jù)基因芯片的結(jié)果,整理出在鹽酸克倫特羅的作用下香豬肌肉組織中表達(dá)差異的基因,在這些基因中預(yù)測(cè)上述microRNA 可能
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