擴(kuò)展青霉FS1884堿性脂肪酶的表征研究及其晶體的培養(yǎng).pdf

1、我國脂肪酶的研究只有40多年歷史，20世紀(jì)60年代末才有報(bào)道。1967年，中國科學(xué)院微生物研究所篩選到一株解枝假絲酵母AS2.1203。20世紀(jì)70年代末我國開始?jí)A性脂肪酶的研究，施巧琴教授于1981年在國內(nèi)成功篩選了堿性脂肪酶生產(chǎn)菌，并且于1984年首次在江蘇南通投入生產(chǎn)。進(jìn)入90年代，我國科技工作者緊跟國際研究熱點(diǎn)，脂肪酶的研究進(jìn)入快速發(fā)展時(shí)期，這些都促進(jìn)和加快了我國脂肪酶領(lǐng)域的研究工作?！　U(kuò)展青霉FS1884堿性脂酶是多代篩選

2、后得到的更優(yōu)良的產(chǎn)酶菌株，本文對(duì)該堿性脂肪酶進(jìn)行了表征、酶學(xué)特性、穩(wěn)定性及結(jié)晶條件的研究，為研究該酶的催化特性及應(yīng)用等方面提供了依據(jù)：　　該堿性脂肪酶N-端氨基酸序列測(cè)定的結(jié)果是：ATADAAAFPDLHRAAKLSSA，等電點(diǎn)為5.44，用質(zhì)譜分析得到該酶的肽質(zhì)紋圖譜，在圖譜中該酶為雙電荷峰，分子量為261380.0922Da，并且不含糖基。賴氨酸氨基，組氨酸咪唑基及二硫鍵是它的活性必需基團(tuán)，而巰基是維持酶的特定結(jié)構(gòu)的重要基團(tuán)，該結(jié)

3、構(gòu)與堿性脂肪酶活力有一定關(guān)系?！　≡撁傅淖钸m作用pH為9.4，最適作用溫度為36℃，在pH7～11與20℃以下相對(duì)穩(wěn)定；二價(jià)離子，特別是Ca2+對(duì)該酶活力有促進(jìn)作用；以橄欖油為底物時(shí)的Km為0.035g/mL，對(duì)硝基苯棕櫚酸為底物時(shí)的Km為60.61μg/mL。羧酸鈉，單糖，雙糖，多元醇對(duì)該堿性脂肪酶都能起到一定的穩(wěn)定效果，尤其是單糖，對(duì)該堿性脂肪酶的熱穩(wěn)定性具有顯著作用?！　∮猛聹?80使在乳化液配制的SDS凝膠中電泳后的脂肪酶復(fù)