臍帶間充質干細胞與臍血CD34+細胞聯合移植治療心肌梗死.pdf

1、目的:探討缺氧預處理(HP)對人臍帶間充質干細胞(hUC-MSCs)免疫調節(jié)作用的影響;研究臍帶間充質干細胞與臍血CD34+(UCB-CD34+)細胞聯合移植對心肌梗死后心功能的影響，并比較聯合移植與UC-MSCs單純移植的治療差異。
　　方法:CoCL2缺氧預處理UC-MSCs。UC-MSCs、外周血單個核細胞(PBMC)、UCB-CD34+于24孔板中共培養(yǎng)（分組:A1=HP-MSCs+hUCB-CD34+cells+PBMC

2、; A2=hUC-MSCs+hUCB-CD34+ cells+ PBMC; Control=hUCB-CD34+cells+PBMC)，收集上清液，ELISA檢測IL-10和IFN-γ。改良Fujita法建立日本大耳白兔心肌梗死模型，隨機分為3組（每組8只）。MI后四周，采用心肌內注射法，將磷酸鹽緩沖液(PBS)、hUC-MSCs、hUC-MSCs聯合hUCB-CD34+細胞注射到梗死的周邊部位（定義為PBS組、hUC-MSCs組和Co

3、trans組）。超聲心動圖檢測基線、心梗后4周、細胞移植后4周的心功能。cTnI、CD31免疫組織化學染色，觀察移植細胞的分化和在梗死或梗死周邊血管新生的情況。HE和Masson染色觀察心肌纖維化的程度。
　　結果:對照組、A1組到A2組，IFN-γ的量逐漸下降((27.00±1.11)pg/ml，(14.20±0.81)pg/ml，(7.22±0.14) pg/ml)，但是IL-10的量逐漸增加((31.68±3.08) pg/

4、ml，(61.42±1.08) pg/ml，(85.85±1.80) pg/ml)。這暗示著hUCB-CD34+細胞可以引起外周血單個核細胞中的淋巴細胞的免疫反應，而hUC-MSCs和HP-MSCs可以抑制這種反應。但是這種免疫抑制效應被缺氧預處理減弱。細胞移植后4周，聯合移植組擁有最少的膠原沉積和最好的心功能。cTnI陽性細胞和CD31陽性管狀結構的存在，證明了細胞向心肌細胞和血管方向的分化。且在聯合移植組血管密度遠遠多于hUC-MS