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1、目的:研究G蛋白偶聯(lián)受體APJ的內(nèi)源性配體多肽apelin-13是否通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的生長(zhǎng)增殖,發(fā)現(xiàn)apelin-APJ系統(tǒng)促血管平滑肌細(xì)胞增殖的新的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
方法:培養(yǎng)大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞,噻唑藍(lán)比色法(MTT)觀察 PI3K抑制劑LY294002和Akt抑制劑1701-1對(duì)apelin-13促VSMCs增殖的影
2、響;Western blot檢測(cè)PI3K、pPI3K、pAkt、pERK1/2、ERK1/2、細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)等的表達(dá)。
結(jié)果:MTT法顯示PI3K抑制劑LY294002和Akt抑制劑1701-1能明顯抑制apelin-13誘導(dǎo)的VSMCs增殖;Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)刺激大鼠血管平滑肌細(xì)胞pPI3K、pAkt表達(dá)增加,以1μM最為明顯
3、;1μM apelin-13分別刺激大鼠 VSMCs0、5、15、30、45、60min,pPI3K、pAkt表達(dá)增加,在30min時(shí)最為明顯;PI3K阻斷劑LY294002明顯抑制apelin-13誘導(dǎo)的PI3K、Akt、ERK1/2的磷酸化及cyclinD1的表達(dá),Akt阻斷劑1701-1明顯抑制apelin-13誘導(dǎo)的Akt、ERK1/2的磷酸化及cyclinD1的表達(dá)。
結(jié)論: Apelin-13通過(guò)PI3K/Akt信
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