房室傳導(dǎo)阻滯模式小鼠的建立.pdf

1、背景：房室傳導(dǎo)阻滯可見于部分心房顫動(dòng)患者，然而其分子機(jī)制并不清楚。三年前陳等報(bào)道KCNQ1基因S140G突變可以引起家族性心房顫動(dòng)，同時(shí)通過(guò)動(dòng)態(tài)心電圖檢查發(fā)現(xiàn)這個(gè)家系中大部分心房顫動(dòng)患者合并房室傳導(dǎo)阻滯，KCNQ1S140G突變與房室傳導(dǎo)阻滯共分離。因此我們推測(cè)房室傳導(dǎo)阻滯與心房顫動(dòng)可能有相同的分子變異基礎(chǔ)。 目的：建立轉(zhuǎn)KCNQ1 S140G突變體小鼠模型，進(jìn)一步明確KCNQ1 S140G突變體致心房顫動(dòng)和或致房室傳導(dǎo)阻滯的病

2、理生理作用。 方法：提取正常人的心肌組織RNA，逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，亞克隆入心肌特異性表達(dá)載體，定點(diǎn)誘變得到KCNQ1 S140G，經(jīng)測(cè)序證實(shí)無(wú)誤后線性化借助顯微注射裝置將其注射入受精卵，移入代孕小鼠輸卵管，進(jìn)行繁殖而建立人S140G突變型KCNQ1心肌特異性表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠模型，對(duì)該模型進(jìn)行遺傳學(xué)檢測(cè)、表達(dá)分析和表型檢測(cè)。 結(jié)果：我們成功建立了人S140G突變型KCNQ1轉(zhuǎn)基因小鼠模型，四品系轉(zhuǎn)基因模式小鼠的心臟中均高度

3、表達(dá)KCNQ1 S140G突變體，對(duì)照組未見突變表達(dá)。小鼠體表心電圖檢測(cè)發(fā)現(xiàn)65％陽(yáng)性小鼠有一度、二度、高度和三度房室傳導(dǎo)阻滯事件，但未見心房顫動(dòng)表型，而未含有該突變的對(duì)照小鼠既未發(fā)現(xiàn)房室傳導(dǎo)阻滯也未見心房顫動(dòng)事件。 結(jié)論： 1．S140G突變型KCNQ1心肌特異性過(guò)表達(dá)可以引起小鼠房室傳導(dǎo)阻滯，但是不能復(fù)制出心房顫動(dòng)表型； 2．KCNQ1的分子缺陷不但與人類心房顫動(dòng)有關(guān)，而且還可引起人類和小鼠房室傳導(dǎo)阻滯；