環(huán)境與基因的交互作用對早期自然流產(chǎn)的影響.pdf

1、目的:
　　早期自然流產(chǎn)（early miscarriage，EM）雖經(jīng)大量研究，由于病因復雜，機制不清，缺乏預防及早期診斷、早期治療的方法。隨著對基因功能研究的深入，基因和環(huán)境與疾病的關聯(lián)已經(jīng)成為疾病研究的新策略。目前關于EM的研究較為局限，雖已知自身免疫紊亂在EM發(fā)病過程中具有重要作用，但其發(fā)生發(fā)展過程中環(huán)境因素的致病風險、環(huán)境與基因交互作用的影響及其與機體自身免疫紊亂的關系研究報道較少。為此采用流行病學調(diào)查、環(huán)境與基因交互作

2、用分析、免疫調(diào)節(jié)細胞檢測等研究方法，探討環(huán)境、基因、免疫等因素對EM的影響及其相互關聯(lián)，為闡明EM的危險因素、發(fā)病機制、早期預防和治療等提供相關科學依據(jù)。
　　研究方法:
　　1.流行病學調(diào)查:應用基于醫(yī)院調(diào)查的病例對照研究方法，采用問卷調(diào)查方式，調(diào)查鄭州市三家省市級醫(yī)院640例妊娠早期流產(chǎn)患者和1280例中晚期正常圍產(chǎn)保健妊娠婦女生活環(huán)境情況，分析環(huán)境因素對妊娠、流產(chǎn)的影響。
　　2.基因多態(tài)性及交互作用分析:對所有

3、調(diào)查對象提取全基因組DNA，分析抑制性免疫調(diào)節(jié)基因Foxp3基因的兩個位點rs3761548、rs5953280和CTLA-4基因的2個位點rs231775和rs5742909的多態(tài)性，采用統(tǒng)計軟件SPSS21.0擬合Logistic和MDR軟件分析基因-基因、基因-環(huán)境的交互作用對流產(chǎn)的影響。
　　3.血清PAEs及Treg檢測:以從事服裝銷售的女性EM患者65例和正常妊娠者49例、非銷售職業(yè)的EM患者65例和正常妊娠者70例為

4、研究對象，采用流式細胞儀檢測外周血及流產(chǎn)胚胎蛻膜組織中調(diào)節(jié)性T淋巴細胞(Treg)的分布變化，采用高效液相色譜法檢測血清中鄰苯二甲酸酯類(PAEs)中鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、苯二甲酸二異辛酯(DEHP)水平，初步探討環(huán)境污染物和Treg數(shù)量變化與EM的關系。
　　結(jié)果:
　　1.銷售職業(yè)、自然流產(chǎn)史、主動流產(chǎn)史、熬夜、夜班可能是早期流產(chǎn)的風險因子:單因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，從事銷

5、售(OR=2.417，95％CI=1.384～2.918)和財務職業(yè)(OR=1.632，95％CI=1.113～2.272)的女性易于自然流產(chǎn);既往的自然流產(chǎn)史（OR=2.583，95％CI=1.197～4.069）和主動流產(chǎn)史（OR=1.872，95％CI=1.066～2.849）是妊娠早期流產(chǎn)的危險因素;經(jīng)常值夜班（OR=1.473，95％CI=1.113～1.842）和經(jīng)常熬夜(OR=1.464，95％CI=1.072～2.820

6、)是妊娠早期流產(chǎn)的危險因素;孕前緊張(OR=1.345，95％CI=1.013～1.626)和工作壓力過大（OR=1.462，95％CI=1.172～1.716）也是流產(chǎn)的危險因素;而妊娠前補充復合維生素（OR=0.761，95％CI=0.485～0.923）和適當體育鍛煉（OR=0.735，95％CI=0.512～0.913）是妊娠早期流產(chǎn)的保護性因素。經(jīng)多因素分析后，銷售職業(yè)（OR=2.417）、自然流產(chǎn)史（OR=3.166）、主動

7、流產(chǎn)史（OR=2.396）、夜班（OR=1.473）、熬夜(OR=1.464)等5種因素顯著增加了流產(chǎn)的風險;而體育鍛煉（OR=0.735）、補充復合維生素（OR=0.761）則是流產(chǎn)的保護性因素。
　　2.Foxp3基因rs3761548的風險等位基因C在病例組與對照組的分布差異有統(tǒng)計學意義(x2=4.927，P=0.012)。突變純合子CC在流產(chǎn)組中顯著高于對照組(x2=6.387，P=0.011)，以及隱性遺傳模型能增加疾病

8、的風險(OR=1.275，95％CI=1.012～1.417)，F(xiàn)oxp3的rs5953280位點與妊娠早期流產(chǎn)無明顯關聯(lián)。CTLA-4的2個位點rs5742909、rs231775與妊娠早期流產(chǎn)無明顯關聯(lián)。
　　3.用Logistic回歸模型分析兩兩位點間交互作用，調(diào)整了職業(yè)、自然流產(chǎn)史、主動流產(chǎn)史、夜班、熬夜、體育鍛煉、補充復合維生素等因素后，結(jié)果顯示四位點間均未見交互作用。用Logistic回歸模型分析四位點與環(huán)境風險因子進

9、行一階交互作用，也未發(fā)現(xiàn)明顯的交互效應。當采用多因子降維法(multifactor dimensionality reduction，MDR)進行高階交互分析時，發(fā)現(xiàn)最佳的交互模型是自然流產(chǎn)史、夜班、熬夜、rs3761548的四因子交互模型，該模型的檢驗平衡集精度為0.62，交叉驗證率為90％，模型P值為0.01。
　　4.服裝銷售病例組血清DBP水平[0.454±0.386(μg/ml)]高于非銷售對照組血清DBP水平[0.21

10、6±0.155(μg/ml)]，差異有統(tǒng)計學意義(P=O.001);服裝銷售病例組外周血及蛻膜組織中Treg[(0.937±0.212)％，(1.136±0.428)％)]顯著低于非銷售對照組[(1.327±0.438)％，(2.115±0.498)％)]，差異有統(tǒng)計學意義（兩組P=0.000）。服裝銷售組的血清DBP水平與其外周血Treg數(shù)量負相關(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.在中國漢族育齡期女性人群中，從事銷售

11、職業(yè)、有自然流產(chǎn)史、主動流產(chǎn)史、夜班工作和經(jīng)常熬夜能顯著增加妊娠早期自然流產(chǎn)的風險;而孕前補充復合維生素、適當?shù)捏w育鍛煉則可以降低自然流產(chǎn)的風險。
　　2.Foxp3基因的rs3761548位點可增加中國漢族育齡期女性妊娠早期自然流產(chǎn)的風險;而且自然流產(chǎn)史、夜班、熬夜以及rs3761548位點四因素之間存在交互效應，能增加流產(chǎn)風險。
　　3.服裝銷售女性血清DBP水平高于非銷售女性，可能影響外周血Treg數(shù)量;早期自然流產(chǎn)可