iNOS基因G954C變異及其與環(huán)境因素交互作用對(duì)慢性乙型肝炎的影響.pdf

1、研究背景：慢性乙型肝炎是嚴(yán)重危害人類身體健康、影響人類期望壽命和生存質(zhì)量的疾病，是目前我國(guó)及眾多國(guó)家的重要疾病負(fù)擔(dān)之一。因此，深入探討慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)理，對(duì)慢性乙型肝炎的防治與診治具有重要的意義。 慢性乙型肝炎是受遺傳與環(huán)境因素共同作用的多因子疾病，基因在該病的發(fā)病中具有重要的作用。有研究表明，基因.環(huán)境交互作用在慢性乙型肝炎的發(fā)病中具有重要影響。 近年來(lái)隨著人類基因組計(jì)劃的迅速發(fā)展和分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用，從基因水平

2、闡明慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制成為醫(yī)學(xué)界關(guān)注的熱點(diǎn)。 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)通過(guò)合成一氧化氮(nitric oxide，NO)在肝臟中具有重要作用近年來(lái)頗受關(guān)注。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，iNOS基因敲除的Hepatitis B virus(HBV)轉(zhuǎn)基因小鼠HBV復(fù)制水平明顯高于正常的HBV轉(zhuǎn)基因小鼠；病毒性肝炎中iNOS的表達(dá)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他肝病組，表明iNOS

3、可能與HBV感染有關(guān)。 iNOS的調(diào)節(jié)主要在轉(zhuǎn)錄水平。其轉(zhuǎn)錄受細(xì)胞因子、脂多糖及其他炎癥介質(zhì)誘導(dǎo)。iNOS基因突變可能會(huì)影響iNOS的產(chǎn)生、功能及活性，從而影響疾病的發(fā)生。資料顯示，iNOS基因G.954C變異者單核細(xì)胞的iNOS活性具有7倍以上升高，并且該突變對(duì)機(jī)體罹患瘧疾具有保護(hù)作用。然而關(guān)于iNOS基因G-954C變異與慢性乙型肝炎之間的關(guān)系，以及該變異與環(huán)境因素之間交互作用對(duì)慢性乙型肝炎患病的影響如何，目前國(guó)內(nèi)外罕見(jiàn)報(bào)道

4、。 研究目的： 1.探討iNOS基因G-954C變異與慢性乙型肝炎之間的關(guān)系。 2.探討iNOS基因G-954C變異與環(huán)境因素之間在慢性乙型肝炎發(fā)病中的交互作用。 研究方法：采用以醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例-對(duì)照研究設(shè)計(jì)。選擇濟(jì)南市某醫(yī)院確診的237例漢族慢性乙肝患者做病例組，238名漢族正常人為對(duì)照組。用PCR限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法檢測(cè)iNOS基因G-954C變異：運(yùn)用t檢驗(yàn)比較計(jì)量資料各組

5、之間的均數(shù)差異；運(yùn)用χ2檢驗(yàn)分析計(jì)數(shù)資料在各組之間的頻數(shù)分布差異；運(yùn)用單因素及多因素Logistic回歸分析iNOS基因G-954C變異與慢性乙型肝炎之間的關(guān)系。iNOS基因G-954C變異與環(huán)境因素之間交互作用采用單純病例研究，并用Logistic回歸分析予以分析。 主要研究結(jié)果： 1.iNOS基因G-954C變異基因型頻率(GG、GC、CC)慢性乙型肝炎組(78.9％、19.0％、2.1％)與對(duì)照組(86.6％、12

6、.6％、0.8％)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.074)，但GC+CC基因型頻率慢性乙型肝炎組(21.1％)顯著高于對(duì)照組(13.4％)(p=0.027)。C等位基因頻率慢性乙型肝炎組(11.6％)也顯著高于對(duì)照組(7.1％)(P=0.018)。用多元非條件Logistic回歸調(diào)整性別、年齡、吸煙、飲酒后，突變基因型仍對(duì)慢性乙型肝炎具有顯著影響(p=0.04.7，OR=1.565，95％CI:1.005-2.438)。 2.iN

7、OS基因G-954C變異與HBV-DNA載量顯著相關(guān)(p=0.014)。低水平HBV-DNA載量在突變基因型患者中占7.6％，而在GG基因型患者中為25.0％，表明該基因變異在一定程度上升高HBV-DNA的復(fù)制水平。 3.iNOS基因G-954C變異與谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine amino transferases，ALT)無(wú)顯著相關(guān)(P=0.126)。ALT升高者在突變基因型患者中占70.0％，而在GG基因型的患者中80.1％

8、。用多元非條件Logistic回歸調(diào)整性別、年齡、吸煙、飲酒后，在突變基因型與GG基因型之間ALT水平仍無(wú)顯著性差異(p=0.144)。 4.iNOS基因G-954C變異與谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate amino transferases.AST)無(wú)顯著相關(guān)(p=0.205)。AST。升高者在突變基因型患者中占80.0％，而在GG基因型患者中為87.1％。用多元非條件Logistic回歸調(diào)整性別、年齡、吸煙、飲酒等后，在突變基

9、因型與GG基因型之間AST水平仍無(wú)顯著性差異(p=0.331)。 5.iNOS基因G-954C變異與病情嚴(yán)重程度顯著相關(guān)(p=0.026)，突變基因型患者中，慢性乙型重度肝炎、肝硬化和肝癌的比例(58.0％)顯著高于GG基因型組(34.8％)。 6.并發(fā)癥的發(fā)生率在突變基因型患者(24.0％)與GG基因型患者(13.9％)之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.084.)。用多元非條件Logistic回歸調(diào)整性別、年齡、吸煙、飲酒

10、后，該變異與并發(fā)癥的發(fā)生仍無(wú)顯著性相關(guān)(P=0.136)。 7.iNOS基因G-954C變異與飲酒之間在慢性乙型肝炎的發(fā)病中存在一定的交互作用，但交互作用無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。未調(diào)整混雜因素時(shí)，兩者之間的交互作用為OR=1.679(P=0.134)；用多元非條件Logistic回歸調(diào)整年齡、性別、吸煙、疾病分期等混雜因素后，兩者之間的交互作用為OR=1.738(p=0.178)。 8. iNOS基因G-954C變異與吸煙之間在慢

11、性乙型肝炎的發(fā)病中無(wú)顯著的交互作用。未調(diào)整混雜因素時(shí)，兩者之間的交互作用為OR=1.232(p=0.592)：用多元非條件Logistic回歸調(diào)整年齡、性別、飲酒、疾病分期等混雜因素后，兩者之間的交互作用為OR=1.104，(p=0.827)。 結(jié)論： 1.iNOS基因G-954C變異可能是中國(guó)漢族慢性乙型肝炎發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素之一。 2.iNOS基因G-954C變異與HBV-DNA載量顯著相關(guān)。具有該基因變異者

12、HBV-DNA復(fù)制水平顯著升高。 3. iNOS基因G-954C變異與ALT水平、AST水平及并發(fā)癥的發(fā)生無(wú)顯著相關(guān)。 4.iNOS基因G-954C變異與病情嚴(yán)重程度顯著相關(guān)，突變基因型發(fā)生慢性乙型重度肝炎、肝硬化和肝癌的可能性顯著升高。 5.iNOS基因G-954C變異與飲酒之間在慢性乙型肝炎的發(fā)病中存在一定的交互作用，雖然此交互作用無(wú)顯著性，這主要是由于本研究樣本較小之故。 6.iNOS基因G-954