應(yīng)用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)建立可調(diào)控抗惡性瘧原蟲DNA疫苗的初步研究.pdf

1、該研究擬應(yīng)用四環(huán)素(tetracycline,Tet)調(diào)控系統(tǒng)建立可調(diào)控的DNA免疫.首先構(gòu)建了惡性瘧原蟲頂端膜抗原1(AMA-1)基因和反式活化因子(tTA或rtTA)基因的真核表達(dá)質(zhì)粒pTL-8/AMA-1和pTL-8/AMA-1(rtTA),并大量制備這兩種質(zhì)粒及表達(dá)轉(zhuǎn)錄抑制子(tTS)的質(zhì)粒pUHS6-1.以pTL-8/AMA-1、pTL-8/AMA-1(rtTA)和pTL-8/AMA-1(rtTA)加pUHS6-1/tTS免疫

2、小鼠后,用四環(huán)素類似物強(qiáng)力霉素(doxycycline,dox)誘導(dǎo)或抑制上述DNA載體內(nèi)AMA-1的表達(dá),并分離小鼠血清檢測針對AMA--1抗體的誘導(dǎo)生成情況.pTL-8/AMA-1和pTL-8/AMA-1(rtTA)在沒有被誘導(dǎo)表達(dá)時(僅基礎(chǔ)表達(dá)),可誘導(dǎo)明顯的免疫應(yīng)答.在以pTL-8/AMA-1(rtTA)與含tTS的pUHS6-1共同免疫后,可極大地降低其免疫應(yīng)答.應(yīng)用dox誘導(dǎo)pTL-8/AMA-1(rtTA)中的AMA-1基