降解大型海藻多糖菌株的分離鑒定及產(chǎn)酶性質(zhì)分析.pdf

1、大型海藻多糖的降解是大型海藻生物質(zhì)能源化和高值化利用的瓶頸問題，為解決該問題，本研究采用常規(guī)平板法從汕頭海濱潮間帶野生大型褐藻藻體分離獲得10株具有降解瓊膠或褐藻膠能力的高效菌株。采用16S rDNA序列分析對(duì)10株菌株進(jìn)行鑒定，結(jié)果表明菌株7-1、17、24、26鑒定為白色噬瓊膠菌（Agarivorans albus）;菌株7、G3、G4、G6鑒定為海洋桿菌（Marinobacter sp.）;菌株3鑒定為鹽單胞菌(Halomonas

2、sp.)；菌株ST-6鑒定為海綿假單胞菌(Pseudomonas pachastrellae)。選取降解海藻多糖能力強(qiáng)的白色噬瓊膠菌17和海綿假單胞菌ST-6，對(duì)其生長(zhǎng)和產(chǎn)酶條件進(jìn)行分析。
　　白色噬瓊膠菌17為高效降解瓊膠的革蘭氏陰性桿菌，在2216E培養(yǎng)基、30℃培養(yǎng)條件下的生長(zhǎng)曲線表明8-24 h為菌株的指數(shù)生長(zhǎng)期，24-72 h生長(zhǎng)存在波動(dòng)，72 h之后達(dá)到穩(wěn)定期。產(chǎn)酶曲線表明菌株17在18-36 h相對(duì)酶活力呈上升趨勢(shì)，

3、36h達(dá)到最高值為201.70 U/mL。36 h之后菌株17酶活呈下降后上升至穩(wěn)定，相對(duì)酶活力保持在154.36 U/mL。生物量較高時(shí)，菌液中的相對(duì)酶活力較高。菌株17培養(yǎng)條件優(yōu)化結(jié)果表明其最適生長(zhǎng)溫度、pH值分別為20-30℃、6-10。菌株17產(chǎn)酶條件優(yōu)化結(jié)果表明其最適產(chǎn)酶溫度、pH值和瓊膠濃度分別為35℃、9和0.3％。其中，溫度為35℃時(shí)，菌液的相對(duì)酶活力最高為290.43 U/mL。
　　海綿假單胞菌ST-6為高效降

4、解瓊膠和褐藻膠的革蘭氏陰性菌，在2216E培養(yǎng)基、30℃培養(yǎng)條件下的生長(zhǎng)曲線表明10-48 h為菌株的指數(shù)生長(zhǎng)期，48 h之后達(dá)到穩(wěn)定期。產(chǎn)酶曲線表明菌株ST-6在20-24 h相對(duì)酶活力出現(xiàn)波動(dòng)，36 h達(dá)到較高值為243.51U/mL。40-48 h呈上升趨勢(shì)，48 h有最高酶活值249.15 U/mL。48 h后酶活先下降后上升，72 h酶活有一個(gè)峰值216.38 U/mL。將生長(zhǎng)曲線與產(chǎn)酶曲線進(jìn)行比較分析，發(fā)現(xiàn)海綿假單胞菌ST-

5、6對(duì)數(shù)期的菌液酶活較高。菌株ST-6培養(yǎng)條件優(yōu)化結(jié)果表明其最適生長(zhǎng)溫度、pH值分別為25-35℃、5-9;菌株ST-6產(chǎn)酶條件優(yōu)化結(jié)果表明其最適產(chǎn)瓊膠酶溫度、pH值、瓊膠濃度和褐藻膠濃度分別為30℃、7、0.3％和0.1％;最適產(chǎn)褐藻膠裂解酶溫度、pH值、褐藻膠濃度分別為35℃、9和0.2％。菌株ST-6的瓊膠酶為非誘導(dǎo)酶，而褐藻膠裂解酶屬于誘導(dǎo)酶。
　　綜上所述，白色噬瓊膠菌17和海綿假單胞菌ST-6適合作為大型海藻生物質(zhì)利用的