高糖狀態(tài)下腎小球系膜細胞JAK2-STAT3途徑的表達變化及作用的研究.pdf

1、糖尿病是一組以慢性高血糖為特征的代謝性疾病，長期高血糖狀態(tài)可導致腎臟的組織損傷、功能障礙和衰竭。在許多國家，糖尿病腎病(DN)已成為導致慢性腎衰的主要病因，在我國DN導致腎衰比率也呈上升趨勢。目前認為，DN發(fā)生發(fā)展機制尚未完全明確，亦缺乏有效的防治方法。因此，進一步探明DN發(fā)病機制并尋找延緩DN進展的方法是目前亟待解決的問題之一。 目前發(fā)現(xiàn)糖尿病微血管病發(fā)生過程中多條細胞內(nèi)信號轉導通路(DAG/PKC、MAPK、JAK/STAT

2、)被激活，即高糖可以通過激活多種細胞內(nèi)信號因子從而導致靶器官損傷。近年來有研究提示，Janus激酶/信號轉導子與轉錄激活子(Janus kinase/signal transducers and activators of transcription，JAK/STAT)通路與系膜細胞的增殖、肥大及細胞外基質(zhì)分泌有關。但高糖狀態(tài)時，STAT家族哪些成員被激活，如何被激活的?哪些因子介導JAK/STATs的病理生理效應?JAK/STAT通

3、路激活對腎臟起什么作用?這些問題有待進一步研究。 糖尿病腎病的主要病理變化為腎小球肥大、細胞外基質(zhì)聚集、基底膜增厚。研究證實轉化生長因子-β1(TGF-β1)是引起細胞外基質(zhì)增多的中介物質(zhì)，在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起著關鍵作用。結締組織生長因子(CTGF)作為TGF-β1的下游調(diào)節(jié)因子，介導和調(diào)節(jié)著TGF-β1的促膠原合成與致硬化作用。而在TGF-β1被阻斷的情況下，CTGF也可以直接上調(diào)粘連蛋白、膠原在系膜細胞外的積聚，說明除

4、TGF-β1外還有其他途徑誘導CTGF的合成及表達。在AGE(糖基化終末產(chǎn)物)誘導NRK-49F(腎臟成纖維細胞)有絲分裂和膠原合成的研究和過氧化物對人晶狀體上皮細胞CTGF影響的實驗中，發(fā)現(xiàn)JAK2/STATs激活可能參與誘導CTGF的表達。但在腎小球系膜細胞，JAK/STAT信號通路的激活是否引起CTGF表達增加尚未見研究報道。 RAS系統(tǒng)激活與DN發(fā)生發(fā)展密切相關。高糖環(huán)境可以使細胞內(nèi)AngⅡ表達增加，而增加的AngⅡ又進

5、一步加強高糖對系膜細胞的作用。AngⅡ可以通過G蛋白偶聯(lián)的AT1受體引起JAK/STAT通路的活化。高糖和AngⅡ共同存在情況下，是否通過JAK/STAT通路的活化而影響DN的病理生理過程，還有待于進一步研究。 為此設計了以下實驗： 1、通過觀察高糖培養(yǎng)大鼠腎小球系膜細胞(GMC)p-STAT3的表達變化，探討糖尿病狀態(tài)下JAK2/STAT3途徑活性的變化。 2、通過利用JAK2阻斷劑(AG-490)阻斷JAK2

6、/STAT3通路和TGF-β1阻斷劑(SB-431542)阻斷TGF-β1與受體的結合，觀察以上兩種阻斷劑對高糖培養(yǎng)下下系膜細胞TGF-β1、CTGF、FN(纖維連接蛋白)表達的變化，探討JAK2/STAT3通路與TGF-β1、CTGF之間的相互作用及對細胞外基質(zhì)分泌的影響。 3、通過不同濃度血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)刺激GMC，觀察不同時點p-STAT3、TGF-β1、CTGF、FN的表達變化及AG-A90對其表達變化的作用，探