2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分、p54nrb/NONO通過SREBP-1a調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝促進乳腺癌增殖機制的研究
  目的:研究p54nrb/不含 POU結構域的八聚核苷酸結合蛋白(non-POU-dormain-containing octamer-bindingprotein,NONO)通過膽固醇調(diào)節(jié)元件蛋白(Sterol regμlatory element-binding proteins-1a,SREBP-1a)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝,促進乳腺癌增殖的分

2、子機制。
  方法:應用免疫組化檢測p54nrb/NONO和SREBP-1蛋白在乳腺癌組織中表達情況,統(tǒng)計分析兩種蛋白表達在乳腺癌中的相關性。通過GST融合蛋白沉降技術(Glutathione-S-transferase-pull down,GST-pull down)、免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)和熒光共定位等分子生物學技術篩選并驗證p54nrb/NONO與SREBP-1a相互結合及其位點

3、,明確p54nrb/NONO蛋白表達變化在SREBP-1a蛋白功能變化中的作用;并分別通過體外細胞學實驗和體內(nèi)裸鼠成瘤實驗探討p54nrb/NONO與SREBP-1a相互作用在脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)及乳腺癌細胞增殖等生物學功能中的作用。
  結果:核蛋白p54nrb/NONO在乳腺癌組織中比癌旁組織高表達,并和SREBP-1a蛋白水平正相關。p54nrb/NONO和SREBP-1a存在相互作用,其中Y267是p54nrb與SREBP-1a結

4、合的關鍵位點。p54nrb/NONO與核蛋白SREBP-1a結合增加了核蛋白SREBP-1a的穩(wěn)定性。在乳腺癌中,p54nrb/NONO促進 SREBP-1a介導的脂質(zhì)合成基因轉錄和脂質(zhì)產(chǎn)物生成,促進體外乳腺癌細胞增殖和體內(nèi)乳腺癌腫瘤生長。
  結論:p54nrb/NONO與SREBP-1a結合促進了脂質(zhì)合成和乳腺癌腫瘤增殖。
  第二部分、辛伐他汀調(diào)節(jié)p54nrb/NONO表達抑制乳腺癌細胞增殖
  目的:探討p54

5、nrb/NONO表達在辛伐他汀抑制乳腺癌MCF-7細胞的增殖及其可能的作用機制。
  方法:通過p54nrb/NONO基因的特異性小干擾RNA片段(siRNA-p54nrb)和p54nrb過表達質(zhì)粒(pcDNA4/TO-p54nrb)轉染技術分別建立低表達和高表達p54nrb/NONO乳腺癌MCF-7細胞株。應用細胞計數(shù)方法分別檢測辛伐他汀作用后MCF-7乳腺癌細胞、低表達和高表達p54nrb/NONO MCF-7乳腺癌細胞株的增

6、殖情況。應用實時熒光定量PCR和western blot分別檢測辛伐他汀作用后MCF-7乳腺癌細胞、低表達和高表達p54nrb/NONO MCF-7乳腺癌細胞株p54nrb的mRNA和蛋白的表達水平、HMGCR的mRNA水平和利用組織總膽固醇酶法測定膽固醇含量變化。
  結果:siRNA-p54nrb轉染組MCF-7細胞中p54nrb mRNA及蛋白的表達水平顯著下降(p<0.01),過表達pcDNA4/TO-p54nrb組,p5

7、4nrb mRNA及蛋白表達水平顯著升高(p<0.01)。辛伐他?。?0μM)有效地抑制MCF-7細胞增殖(p<0.05);辛伐他汀作用MCF-7細胞后,p54nrb的mRNA和蛋白表達水平明顯降低(p<0.05);轉染siRNA-p54nrb下調(diào)p54nrb表達,MCF-7細胞增殖受到明顯抑制(p<0.05),過表達p54nrb蛋白促進了乳腺癌MCF-7細胞增殖(p<0.05);MCF-7細胞中過表達 p54nrb的同時聯(lián)合辛伐他汀作

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