HIC1抑制胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究.pdf

1、研究背景和目的：癌高甲基化基因(HIC1)是一個(gè)腫瘤抑制基因，在人類多種腫瘤組織中，HIC1經(jīng)常出現(xiàn)表達(dá)缺失或啟動(dòng)子區(qū)域高甲基化表觀遺傳修飾而表達(dá)沉默的現(xiàn)象，這通常預(yù)示著腫瘤的不良預(yù)后。然而，HIC1在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用沒(méi)有闡明，特別在調(diào)控胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的分子機(jī)制方面沒(méi)有報(bào)道。在本研究中，我們主要探索HIC1表達(dá)水平對(duì)胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響以及分子機(jī)制研究，并最終為胰腺癌尋求有效的治療靶點(diǎn)奠定基礎(chǔ)。
　　實(shí)驗(yàn)方法與材料：

2、我們收集了手術(shù)后切除的胰腺癌組織和幾種常見(jiàn)的胰腺癌細(xì)胞系，運(yùn)用免疫印跡和定量PCR的方法檢測(cè)了HIC1的mRNA和蛋白表達(dá)水平。然后，我們通過(guò)對(duì)胰腺癌組織芯片免疫組化染色的方法，評(píng)估HIC1的表達(dá)與胰腺癌病理特征的關(guān)聯(lián)，并全面統(tǒng)計(jì)分析了臨床病例資料，分析患者的生存與預(yù)后。進(jìn)一步，我們通過(guò)過(guò)表達(dá)和RNAi干擾技術(shù)，在體內(nèi)體外水平，探討HIC1的表達(dá)水平對(duì)胰腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。最后，我們運(yùn)用免疫共沉淀和激光共聚焦的技術(shù)，確定了HIC

3、1與STAT3的相互作用，并通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)和ChIP-PCR技術(shù)，檢測(cè)HIC1對(duì)IL-6/STAT3信號(hào)通路的作用。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：HIC1在胰腺癌組織和胰腺癌細(xì)胞系SW1990、ASPC-1、PANC-1、BXPC-3、MIAPACA-2中明顯表達(dá)下調(diào)或者沉默丟失。組織芯片顯示HIC1在腫瘤組織和癌旁組織中表達(dá)具有顯著性差異。HIC1的表達(dá)丟失與腫瘤的惡性程度和患者的不良預(yù)后明顯相關(guān)。體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，恢復(fù)HIC1的

4、表達(dá)能顯著抑制胰腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力，下調(diào) HIC1的表達(dá)能促進(jìn)胰腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移。HIC1與STAT3相互結(jié)合形成復(fù)合物，抑制STAT3轉(zhuǎn)錄活性，從而抑制 IL-6/STAT3信號(hào)通路下游靶基因c-Myc，VEGF，Cyclin D1，MMP2，MMP9的表達(dá)。
　　結(jié)論：HIC1是IL-6/STAT3信號(hào)通路的負(fù)性調(diào)節(jié)因子。HIC1抑制胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移主要與其抑制STAT3信號(hào)通路侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)關(guān)鍵基因(c-Myc、Cyclin D1