荷葉生物堿對人THP-1源性巨噬細(xì)胞LOX-1表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]
　　觀察荷葉生物堿對人THP-1源性巨噬細(xì)胞LOX-1表達(dá)的影響，探討荷葉生物堿抗動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)的可能機(jī)制。
　　[方法]
　　1.用PMA誘導(dǎo)人單核細(xì)胞株THP-1分化為巨噬細(xì)胞后，分別與不同濃度ox-LDL（0mg/L，25 mg/L，50 mg/L，100 mg/L）孵育24h;提取總RNA和蛋白，分別用熒光定量PCR、Western blot分別檢測細(xì)胞中LOX-

2、1mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。
　　2.用PMA誘導(dǎo)人單核細(xì)胞株THP-1分化為巨噬細(xì)胞后，隨機(jī)分為五組:除單純細(xì)胞組和單純氧化低密度脂蛋白組，其余三組予不同濃度荷葉生物堿(25mg/L、50 mg/L、100 mg/L)孵育24h，然后荷葉生物堿干預(yù)組和單純氧化低密度脂蛋白組予50 mg/Lox-LDL共同孵育24h;提取總RNA和蛋白，分別并用熒光定量PCR、Western blot分別檢測細(xì)胞中LOX-1mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。

3、
　　[結(jié)果]
　　1.鏡下觀察到人單核細(xì)胞株THP-1在PMA誘導(dǎo)下由懸浮狀態(tài)變?yōu)橘N壁狀態(tài)，且細(xì)胞形狀由圓形變?yōu)樗笮?、橢圓形或不規(guī)則形，提示THP-1細(xì)胞已轉(zhuǎn)化成巨噬細(xì)胞。
　　2.ox-LDL刺激組:熒光定量PCR及Western blot分別檢測提示:與空白對照組比較，ox-LDL各劑量組皆可上調(diào)LOX-1mRNA及蛋白表達(dá)，在(0-50) mg/L劑量范圍內(nèi)呈明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系(P＜0.01)。
　　3

4、.荷葉生物堿干預(yù)組:熒光定量PCR及Western blot分別提示:與單純ox-LDL刺激組比較，荷葉生物堿處理組細(xì)胞LOX-1mRNA、蛋白表達(dá)呈濃度依賴性降低(P＜0.01）。
　　[結(jié)論]
　　1.ox-LDL上調(diào)人THP-1源性巨噬細(xì)胞LOX-1的表達(dá)，增加人THP-1源性巨噬細(xì)胞膽固醇蓄積，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞泡沫化;并且這種作用隨ox-LDL濃度的增加而增強(qiáng);
　　2.荷葉生物堿下調(diào)人THP-1源性巨噬細(xì)胞LOX