LDL、oxLDL對THP-1源性巨噬細胞PCSK9、LDLR表達的影響研究.pdf

1、目的：探討LDL、oxLDL處理THP-1源性巨噬細胞后LDLR和PCSK9表達的變化，研究LDL、oxLDL對PCSK9、LDLR的不同影響，探討THP-1源性巨噬細胞中PCSK9、LDLR之間的關系。 方法：THP-1細胞與160nmol/L的佛波酯孵育24h，誘導成貼壁的巨噬細胞后，用0μg/ ml、10μg/ml、20μg/ ml、30μg/ ml的LDL處理THP-1巨噬細胞，油紅O染色檢測細胞荷脂情況，免疫熒光檢測T

2、HP-1細胞上PCSK9蛋白表達及分布情況，RT-PCR、Western blot檢測THP-1巨噬細胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白質的表達。用0μg/ ml、10μg/ ml、20μg/ ml、30μg/ ml的oxLDL 處理THP-1巨噬細胞，油紅O染色檢測細胞荷脂情況，RT-PCR、Western blot分別檢測THP-1巨噬細胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白質的表達。 結果:0μg/ ml、10μg

3、/ml、20μg/ ml、30μg/ ml的LDL處理THP-1巨噬細胞后，油紅O染色發(fā)現(xiàn)，隨著LDL濃度的增大，細胞內脂滴數目增多，呈散在分布，免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)PCSK9在THP-1源性巨噬細胞上有較強的表達，并且隨著LDL濃度的增加而增多，RT-PCR、Western blot檢測發(fā)現(xiàn)，LDL可以下調THP-1源性巨噬細胞中LDLR的表達，呈濃度依賴性，而同時PCSK9的表達上調，也呈濃度依賴性；用0μg/ ml、10μg/ml、2

4、0μg/ ml、30μg/ ml的oxLDL 處理THP-1源性巨噬細胞，油紅O染色發(fā)現(xiàn)，細胞里面出現(xiàn)可見脂滴，而且隨著oxLDL濃度的增大，脂滴顆粒逐漸增大、增多，聚集成團。在本實驗濃度范圍內，oxLDL處理對THP-1巨噬細胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白質的表達影響均不明顯。 結論：THP-1源性巨噬細胞上，同時有PCSK9和LDLR的表達； oxLDL對THP-1源性巨噬細胞LDLR表達沒有影響，在本實驗研究的濃