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文檔簡介
1、目的:
本實驗以人THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞為對象,研究在成纖維細胞生長因子21(FGF21)作用下,細胞內三磷酸腺苷結合盒轉運體A1和G1(ATP binding cassette transporter A1/G1,ABCA1/G1)的表達變化,以及細胞內膽固醇流出的變化,并研究其上游調控因子LXRα在此過程中所扮演的角色。從而探討FGF21在抗動脈粥樣硬化過程中的可能作用和機制。
方法:
1.TH
2、P-1巨噬細胞源性泡沫細胞經(jīng)不同濃度的FGF21(10、50、100ng/ml)處理后,提取各組細胞總RNA和蛋白質;
2.RT-qPCR檢測各組細胞ABCA1、ABCG1和LXRα的mRNA水平;
3.Western blot檢測各組細胞ABCA1、ABCG1和LXRα的蛋白水平;
4.閃爍計數(shù)法檢測各組細胞內膽固醇流出率;
5.siRNA方法沉默LXRα后,給予100ng/ml的FGF21處理
3、泡沫細胞。同上述方法,檢測各組細胞ABCA1和ABCG1的mRNA和蛋白表達的變化,以及細胞內膽固醇流出率的變化。
結果:
1.RT-qPCR顯示,不同濃度FGF21處理組ABCA1、ABCG1和LXRα的mRNA水平較對照組增高,且此作用隨著FGF21濃度的增加而逐漸增強;
2.Western blot顯示,不同濃度FGF21處理組ABCA1、ABCG1和LXRα的蛋白水平較對照組增高,且此作用隨著FGF
4、21濃度的增加而逐漸增強;
3.閃爍計數(shù)法顯示,不同濃度FGF21處理組細胞內膽固醇流出率較對照組增加,且此作用隨著FGF21濃度的增加而逐漸增強(P<0.05);
4.LXRα-siRNA方法能夠減弱FGF21上調ABCA1和ABCG1表達的作用,也減弱FGF21促進膽固醇流出的作用。
結論:
FGF21通過LXRα途徑,上調THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞中ABCA1和ABCG1的表達,從而促進
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