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文檔簡介
1、第一部分血管緊張素Ⅱ?qū)HP-1源性巨噬細(xì)胞膽固醇含量的影響 目的:將THP-1單核細(xì)胞株誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞,以THP-1源性巨噬細(xì)胞為研究對象,探討血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)對THP-1源性巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量的影響。 方法:用PMA將人源單核細(xì)胞株THP-1誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞,以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)溫孵育巨噬細(xì)胞48小時(shí),同時(shí)分別加入不同濃度的AngⅡ及厄貝沙坦(Irbe
2、sartan,Irb);采用酶法,通過HITACHI650-60型熒光分光光度計(jì),以325nm為激發(fā)光波長,415nm為熒光發(fā)射波長,檢測細(xì)胞內(nèi)、外膽固醇含量的變化。 結(jié)果:AngⅡ能引起THP-1源性巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量顯著增高(p<0.05)、并成濃度依賴性;AngⅡ受體拮抗劑Irb能顯著減少細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量(p<0.05)。 結(jié)論:AngⅡ可引起THP-1源性巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量顯著增高,促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成,加速動脈
3、粥樣硬化。 第二部分血管緊張素Ⅱ?qū)HP-1源性巨噬細(xì)胞ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A1表達(dá)的影響 目的:將THP-1單核細(xì)胞株誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞,建立細(xì)胞模型作為研究對象,探討血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)對THP-1源性巨噬細(xì)胞ABCA1的表達(dá)調(diào)控作用。 方法:用PMA將人源單核細(xì)胞株THP-1誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞,以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)溫孵育巨噬細(xì)胞48小時(shí),同時(shí)分別加入不同濃
4、度的AngⅡ及Irb;運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和Westernblot分別檢測ABCA1mRNA與ABCA1蛋白的表達(dá)的變化。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)顯示,不同濃度的AngⅡ(10-7、10-6、10-5mol/L)引起ABCA1表達(dá)的變化,與對照組及組間相比,均有較顯著差異,并成濃度依賴性。RT-PCR結(jié)果顯示,與對照組相比,mRNA表達(dá)分別下降(10.5±1.9)%、(22.6±5.3)%、(44±3.7)%,Weste
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