基于牛乳鐵蛋白的抗菌肽設(shè)計與初步效應(yīng)研究.pdf

1、針對當(dāng)前抗菌藥物耐藥性的與日增強(qiáng)，特別是抗生素的濫用日趨嚴(yán)重，人類亟需開發(fā)出一類高效、低毒、無殘留的新型抗菌藥物。而抗菌肽具有抗菌譜廣、穩(wěn)定性好、副作用小、無耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，有望克服當(dāng)前抗菌藥物的耐藥性強(qiáng)、副作用大等系列難題。目前，已有多種抗菌活性多肽分子設(shè)計與改造方法用于抗菌肽研究，期望在提高抗菌活性同時進(jìn)一步提高其血漿中穩(wěn)定性，降低毒副作用，進(jìn)而為抗菌肽進(jìn)入臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)；盡管現(xiàn)有抗菌肽的分子改造取得了可喜進(jìn)展，但在抗菌活性、化學(xué)合

2、成、細(xì)胞毒性尤其是抗酶解等方面還存在諸多難題。
　　基于上述研究現(xiàn)狀，本文借鑒小分子陽離子抗菌肽的設(shè)計理念，保留其“肽鏈短、電荷高、兩親性強(qiáng)、優(yōu)勢氨基酸多”的優(yōu)點(diǎn)的同時引入非天然氨基酸的設(shè)計方法。以陽離子抗菌肽LfcinB64-9(RRWQWR)為模板，基于抗菌肽模式序列要求、優(yōu)勢位點(diǎn)的氨基酸結(jié)構(gòu)及其化學(xué)修飾，開展抗菌肽的虛擬組合設(shè)計，并通過定量構(gòu)效關(guān)系分析實(shí)現(xiàn)其高通量篩選，具體如下：
　　1、對現(xiàn)有抗菌肽數(shù)據(jù)庫(APD2)

3、中的抗菌肽進(jìn)行一級序列比對分析，確定陽離子抗菌肽的序列模式；
　　2、對現(xiàn)有陽離子抗菌肽進(jìn)行定量構(gòu)效關(guān)系研究，確定核心序列的優(yōu)勢氨基酸及其化學(xué)修飾方法；
　　3、以LfcinB64-9為模板，基于序列模式、優(yōu)勢位點(diǎn)的氨基酸及其化學(xué)修飾，虛擬產(chǎn)生結(jié)構(gòu)多樣的抗菌肽庫；
　　4、基于構(gòu)效關(guān)系分析結(jié)果篩選并進(jìn)行合成；
　　5、通過抗菌活性、細(xì)胞毒性、血漿穩(wěn)定性考查篩選出所設(shè)計的最好抗菌肽，為下一步的成藥奠定基礎(chǔ)。

4、　　本文主要的研究成果是：1、建立基于非天然氨基酸的小分子陽離子抗菌肽的設(shè)計路線：2、成功的篩選到五條高效、低毒、副作用小、無耐藥性的抗菌活性多肽。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明引入非天然氨基酸修飾改造“肽鏈短、電荷高、兩親性強(qiáng)、優(yōu)勢氨基酸多”的小分子陽離子抗菌肽的設(shè)計理念和虛擬組合設(shè)計方法，節(jié)約了新型抗菌肽設(shè)計與篩選的時間和成本，并提高了抗菌肽分子設(shè)計的合理性和可行性。本文所設(shè)計、篩選的五條抗菌肽有望成為結(jié)構(gòu)特異性好、體內(nèi)抗酶解能力強(qiáng)、作用