2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、本研究采用一向不連續(xù)酸性聚丙烯酰胺凝膠電泳(A-PAGE)技術(shù)分析小麥高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)組成。用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)系統(tǒng)分析95個(gè)小麥品種的高分子量谷蛋白亞基組成，將這些已知亞基組成的小麥品種在酸性聚丙烯酰胺凝膠電泳系統(tǒng)中分析，用于酸性聚丙烯酰胺凝膠電泳條件的摸索和確定。 酸性聚丙烯酰胺凝膠電泳系統(tǒng)中高分子量谷蛋白亞基的有效提取是非常重要的。本研究用40％正丙醇中去除可溶性蛋白(醇

2、溶蛋白和可溶性谷蛋白)，高分子量谷蛋白亞基在含有0.154％二硫蘇糖醇(DTT)的40％正丙醇中提取并還原，然后用0.21％4-乙烯基毗啶烷基化30min。用40％丙酮沉淀谷蛋白，獲得高純度的HMW-GS，HMW-GS在40％正丙醇中重新溶解，并加入等體積含有2M尿素、40％蔗糖、0.01％甲基綠的0.016M乳酸一乳酸鈉樣品緩沖液(pH2.9)用于電泳分析。對(duì)影響HMW-GS在A-PAGE系統(tǒng)中分離的因素進(jìn)行比較分析，選擇乳酸-乳酸鈉

3、緩沖液作為A-PAGE的緩沖系統(tǒng)，確定了A-PAGE系統(tǒng)的主要電泳參數(shù)。樣品在100mm(寬)×130mm(高)×1mm(厚)的聚丙烯酰胺凝膠中600V恒壓電泳3小時(shí)。蛋白的固定和染色在染色液內(nèi)同步進(jìn)行，使試驗(yàn)步驟得到簡(jiǎn)化。凝膠脫色24小時(shí)后，獲得了背景清晰的電泳圖譜。對(duì)比SDS-PAGE，A-PAGE系統(tǒng)中凝膠的聚合速度快，膠體強(qiáng)度適中，電泳譜帶清晰，對(duì)高分子量谷蛋白亞基有更高的分辨率。 在A-PAGE系統(tǒng)中，高分子量谷蛋白亞

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