2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:①研究丙戊酸(valproicacid,VPA)對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠皮質(zhì)和海馬神經(jīng)細(xì)胞缺氧損傷的作用。②研究VPA預(yù)干預(yù)對(duì)永久性MCAO大鼠模型腦神經(jīng)細(xì)胞缺血缺氧損傷的作用。③探討VPA對(duì)神經(jīng)細(xì)胞缺氧缺血損傷的作用機(jī)制。 方法:①利用無血清神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)新生大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞和海馬神經(jīng)細(xì)胞,按0.1mM、0.5mM、1.0mM和20mM的濃度加入VPA后進(jìn)行缺氧復(fù)氧處理,觀察VPA處理對(duì)神經(jīng)細(xì)胞缺氧損傷后的細(xì)胞生長(zhǎng)和突起生

2、長(zhǎng)的影響,光學(xué)顯微鏡下觀察,記數(shù)活細(xì)胞數(shù)。數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)或單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,比較結(jié)果。②SD大鼠分為對(duì)照組、VPA小劑量組、VPA中劑量組、VPA大劑量組和VPA超大劑量組,分別以0mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg劑量的VPA灌胃給藥,第七天參照Longa法建立永久性MCAO大鼠腦梗死模型,術(shù)后清醒時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)和72小時(shí)分別進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分,最后一次評(píng)分后處死大鼠,

3、采血測(cè)血藥濃度,將每個(gè)大鼠腦切成腦片,利用圖形軟件計(jì)算腦梗死體積,結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)或單因素方差分析,確定VPA預(yù)干預(yù)在缺血性腦損傷中的保護(hù)作用。利用免疫組化技術(shù),觀察VPA預(yù)處理后腦組織pERK1/2、caspase-3、HSP70和BrdU的表達(dá),陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)后經(jīng)t檢驗(yàn)與對(duì)照組進(jìn)行比較,對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步的探討。 結(jié)果:①在VPA對(duì)皮質(zhì)細(xì)胞缺氧損傷中,大劑量組細(xì)胞存活明顯好于缺氧對(duì)照組(P<0.001),超大劑量組細(xì)胞存活明顯

4、差于缺氧對(duì)照組(P<0.000)。在VPA對(duì)海馬細(xì)胞缺氧損傷組中,中劑量組和大劑量組細(xì)胞存活明顯好于缺氧對(duì)照組(P<0.041;P<0.08),而超大劑量組細(xì)胞存活明顯差于缺氧對(duì)照組(P<0.015)。②VPA中劑量組和大劑量組突起生長(zhǎng)長(zhǎng)度明顯長(zhǎng)于缺氧對(duì)照組(P<0.050H和P<0.022)。對(duì)海馬神經(jīng)元也得到了相似的結(jié)果。③缺氧復(fù)氧后細(xì)胞和缺氧復(fù)氧后再培養(yǎng)5天的細(xì)胞均呈Bcl-2陽性,缺氧對(duì)照組呈弱陽性,而VPA處理各組均呈強(qiáng)陽性。

5、④神經(jīng)功能評(píng)分結(jié)果,在48小時(shí)時(shí)間點(diǎn),小劑量組和中劑量組好于對(duì)照組(P<0.05);在72小時(shí)時(shí)間點(diǎn),小劑量組好于對(duì)照組相(P<0.05)⑤四組的腦梗死平均體積之間均有差異,對(duì)照組大鼠腦梗死的平均體積最大,與對(duì)照組相比較,VPA各處理組平均腦梗死體積均縮小。與對(duì)照組比較,中劑量組和大劑量組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05;P<0.05),而小劑量組沒達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性標(biāo)準(zhǔn)(P>0.05)。⑥皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示VPA處理組神經(jīng)細(xì)胞存活數(shù)目顯著

6、多余對(duì)照組(P<0.05)⑦pERK1/2表達(dá)在缺血側(cè)大腦頂葉皮質(zhì)層細(xì)胞和紋狀體外側(cè)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)內(nèi),VPA組明顯強(qiáng)于對(duì)照組,海馬處未見陽性細(xì)胞。⑧與照組強(qiáng)相比,VPA處理組caspase-3表達(dá)明顯減弱,表明VPA能夠減少缺血誘導(dǎo)的caspase-3的表達(dá)(P<0.001)。⑨缺血72小時(shí)后VPA組在缺血側(cè)的大腦皮質(zhì)、海馬和紋狀體均有HSP70表達(dá);缺血對(duì)照組在皮質(zhì)和海馬弱表達(dá),壞死紋狀體區(qū)域幾乎沒有陽性表達(dá)。細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示VPA組皮質(zhì)和海

7、馬HSP70表達(dá)與對(duì)照組比較具有顯著差異(P<0.001)。⑩在海馬CA1區(qū)可見陽性BrdU細(xì)胞,與對(duì)照組比較,VPA處理組病側(cè)海馬CA1區(qū)陽性細(xì)胞明顯增多(P<0.001),提示PVA對(duì)MCAO大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞具有誘導(dǎo)增殖作用。 結(jié)論:①VPA對(duì)離體和在體神經(jīng)細(xì)胞缺血、缺氧性損傷具有肯定的神經(jīng)保護(hù)作用,并且此神經(jīng)保護(hù)作用與其劑量大小有一定關(guān)系。 ②VPA神經(jīng)保護(hù)機(jī)制涉及HSP70表達(dá)的提高和caspase-3表達(dá)的抑

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