大鼠腦缺血后神經(jīng)細(xì)胞自身修復(fù)機(jī)制的初步研究.pdf

1、腦缺血是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病,缺血后神經(jīng)細(xì)胞的存亡與否取決于神經(jīng)元損傷程度和自身修復(fù)能力之間的平衡.因此,研究各種措施在缺血后是如何加強(qiáng)神經(jīng)元修復(fù)、減輕神經(jīng)元損傷已成為當(dāng)今的熱點(diǎn).血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)作為一種重要的神經(jīng)營養(yǎng)因子,腦缺血后表達(dá)增加;且外源性VEGF具有神經(jīng)保護(hù)作用.然而對于內(nèi)源性VEGF是否具有神經(jīng)保護(hù)作用,其機(jī)理如何,目前還不清楚.因此,我們首先研究了內(nèi)源性VEGF是否具有神經(jīng)保護(hù)作用,進(jìn)一步探討這種作用是

2、否同影響神經(jīng)細(xì)胞的DNA修復(fù)作用有關(guān).與此同時,越來越多的研究結(jié)果表明成年腦內(nèi)持續(xù)存在著神經(jīng)元再生;腦缺血可上調(diào)大腦皮層和海馬的神經(jīng)元再生,這可能是一種重要的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制.因此,在第二部分工作中,我們研究了腦缺血后紋狀體內(nèi)是否存在神經(jīng)元再生;如果有的話,新生神經(jīng)元來自何處及電刺激是否可以上調(diào)缺血腦的神經(jīng)元再生.第一部分:VEGF對缺血損傷腦的保護(hù)作用及其機(jī)制分析.在該部分的研究中,我們首先應(yīng)用VEGF反義寡聚脫氧核苷酸(antisens

3、e ODN)抑制腦缺血誘導(dǎo)的內(nèi)源性VEGF高表達(dá),在明確了VEGF antisense ODN在動物腦內(nèi)應(yīng)用的有效性后,觀察VEGF antisense ODN對缺血性神經(jīng)元損傷的影響以了解內(nèi)源性VEGF是否具有神經(jīng)保護(hù)作用,以及VEGF的神經(jīng)保護(hù)作用是否同DNA修復(fù)因子ERCC6 mRNA表達(dá)水平的變化有關(guān).第二部分:成年大鼠缺血損傷腦的神經(jīng)元再生修復(fù)及電刺激的上調(diào)作用.在該部分研究中,我們在成年大鼠腦缺血前將熒光染料DiI注射至側(cè)腦

4、室中,以選擇性標(biāo)記側(cè)腦室室旁區(qū)的細(xì)胞;在腦缺血后腹腔內(nèi)注射BrdU以標(biāo)記新生細(xì)胞;應(yīng)用免疫組化雙標(biāo)結(jié)合激光共聚焦顯微觀察明確紋狀體內(nèi)是否存在著新生神經(jīng)元及神經(jīng)元遷移、以及給予電刺激后對此的影響.小結(jié):1.腦缺血后紋狀體內(nèi)存在著新生神經(jīng)元,其部分是由側(cè)腦室室旁區(qū)遷移而來.2.電刺激可促進(jìn)腦缺血后新生神經(jīng)元從側(cè)腦室室旁區(qū)向紋狀體外側(cè)遷移并發(fā)育成熟.此過程可能對缺血損傷腦的修復(fù)及神經(jīng)功能的恢復(fù)起一定的作用.3.電刺激對神經(jīng)保護(hù)的作用可能同其上