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文檔簡介
1、該論文的工作意在克隆小鼠次級淋巴樣組織趨化因子（SLC）基因,并構(gòu)建其真核表達載體pcDNA3.1（+）-mSLC,繼而研究這一真核表達載體在體內(nèi)外的表達,以及表達產(chǎn)物的免疫趨化功能.為此,首先用RT-PCR的方法從C57BL/6小鼠胸腺組織克隆出SLC基因,并通過測序證明這一基因即為小鼠SLC基因Scya21b型;繼而構(gòu)建真核表達載體pcDNA3.1（+）-mSLC.In vitro,利用基因槍、脂質(zhì)體、電穿孔的方法,將pcDNA3.
2、1（+）-mSLC分別轉(zhuǎn)染至小鼠黑色素瘤細胞系B16F10、B16P15和小鼠紅白血病細胞系FBL-3,通過趨化小室趨化實驗檢測表明,轉(zhuǎn)染SLC基因的腫瘤細胞培養(yǎng)上清具有針對淋巴細胞的趨化功能.In vivo,利用基因槍的手段,對小鼠皮膚局部轉(zhuǎn)染SLC基因.通過皮膚病理檢查發(fā)現(xiàn),與轉(zhuǎn)染空載體相比,基因槍轟擊局部皮內(nèi)有明顯的淋巴細胞浸潤.說明基因槍介導的SLC基因在體內(nèi)能夠表達,并具有趨化活性.用G<,418>對轉(zhuǎn)染SLC基因的B16P1
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