CDH4基因真核表達載體的構(gòu)建及其在鼻咽癌中的功能研究.pdf

1、CDH4基因編碼的R-Cadherin是鈣粘蛋白家族成員之一，近年來發(fā)現(xiàn)CDH4有可能在胃腸道腫瘤中是一個候選腫瘤抑制基因。我們在本研究組的前期實驗中發(fā)現(xiàn)CDH4基因在鼻咽癌細胞系CNE1、CNE2、TW03、C666中表達沉默，而在正常鼻咽癌細胞系NP69中高表達；在NPC細胞系中均可以檢測到CDH4的啟動子區(qū)甲基化，且用甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-Aza-dC可以使細胞系中CDH4重新表達。鼻咽癌組織中CDH4的轉(zhuǎn)錄表達水平顯著低于正常鼻

2、咽組織中的水平；CDH4基因啟動子甲基化可在90％的鼻咽癌組織中檢測到，在正常鼻咽上皮細胞株及正常鼻咽組織中則全為非甲基化。為明確CDH4在鼻咽癌中的作用，我們從CDH4高表達的正常腦組織中克隆出CDH4基因，構(gòu)建其真核表達載體，將其轉(zhuǎn)染至不表達CDH4的鼻咽癌細胞株并篩選獲得了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CDH4的鼻咽癌細胞株。轉(zhuǎn)染后細胞的生長抑制實驗、克隆形成實驗、遷移運動試驗、劃痕熒光染料示蹤試驗的結(jié)果顯示，CDH4可抑制鼻咽癌細胞生長，降低鼻咽癌細