Smurf2條件性敲除小鼠胚胎干細胞的獲得與鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Smurf2(Smad ubiquitination regulatory factor2)是泛素-蛋白酶體系統(tǒng)中E3泛素連接酶HECT家族中的一員，與TGF-β/Smad信號通路密切相關。Smurf2主要通過降解TGF-β/Smad信號通路中的受體(TGF-βR)，轉(zhuǎn)錄因子Smads，從而對TGF-β/Smad信號通路進行負調(diào)控。然而，Smurf2敲除小鼠在生長發(fā)育過程中并沒有明顯的異常，同時敲除Smurf2和Smurf1卻導致胚胎致

2、死，猜測可能是由于其同家族成員Smurf1在功能上對Smurf2具有代償作用。
　　 為了排除Smurf1對Smurf2功能上的補償效應，精確研究其在不同生長發(fā)育階段對TGF-β信號通路的調(diào)節(jié)機制，我們進行了Smurf2條件性敲除小鼠模型的構(gòu)建。在條件性敲除質(zhì)粒的構(gòu)建方面，運用PCR技術將兩端的同源臂和目標敲除外顯子分段從小鼠基因組中擴增出來，通過構(gòu)建中間質(zhì)粒將所有的片段連接起來，并接入外源的loxP、Frt-Neo-Frt-l

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