NF-κB抑制劑對兔腹主動脈瘤的抑制作用.pdf

1、目的：
　　建立兔腎下腹主動脈瘤（abdominal aortic aneurysm，AAA）模型，從大體形態(tài)、組織病理學(xué)、血液學(xué)等方面研究吡咯烷二硫氨基甲酸（pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC）對AAA擴張的抑制作用，為臨床開發(fā)和應(yīng)用相關(guān)藥物治療AAA提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　選取健康雄性新西蘭大耳兔30只，體重2.01±0.16 kg，采用氯化鈣溶液浸潤兔腎下腹主動脈段建立AAA

2、模型，術(shù)后4 w對手術(shù)兔行剖腹檢查，游標(biāo)卡尺測量浸潤段腹主動脈的直徑，以浸潤段腹主動脈擴張超過其近端正常腹主動脈直徑50％作為造模成功標(biāo)準(zhǔn)，計算擴張率。術(shù)后4 w時將確認(rèn)造模成功的25只兔，隨機分為5組，即PDTC低、中、高劑量組（10、20、30 mg/kg體重），生理鹽水組，空白對照組，PDTC用1 mL生理鹽水配制成懸浮液灌服，生理鹽水組每天灌服生理鹽水，連續(xù)用藥4 w，另取未行手術(shù)兔5只，常規(guī)飼養(yǎng)，作為實驗正常對照。血細(xì)胞分析儀

3、測定各組實驗兔用藥前及用藥后1w、2w、3w、4 w血常規(guī)參數(shù)變化；采用ELISA法測定血液循環(huán)促炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）的含量變化。實驗結(jié)束犧牲實驗動物，開腹觀察AAA的形狀、大小、及鈣化程度；截取浸潤段腹主動脈，采用HE染色評價PDTC治療前后動脈瘤壁炎性細(xì)胞浸潤及彈力纖維降解情況。實驗數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理，采用單因素方差分析和t檢驗進行統(tǒng)

4、計學(xué)分析，結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x±s）表示，P＜0.05判定為差異顯著性。
　　結(jié)果：
　　1.本實驗應(yīng)用氯化鈣溶液浸潤法成功建立兔AAA模型，30只兔分批建模，4周后共25只造模成功，成瘤率96.15%。術(shù)前、術(shù)后4周25只成模兔腹主動脈直徑分別為1.29±0.29 mm和2.83±0.19 mm，平均擴張率為111.08%。
　　2.用藥4周后瘤體直徑：空白對照組瘤體直徑為3.81±0.29 mm，生理鹽水組瘤

5、體直徑為3.86±0.34 mm，與用藥前相比瘤體直徑極顯著增大（P＜0.01）；PDTC低、中、高劑量組瘤體直徑為3.05±0.14 mm、2.99±0.20 mm、2.97±0.10 mm，PDTC各組瘤體直徑與用藥前相比均增大但無統(tǒng)計學(xué)意義；用藥后生理鹽水組與對照組相比無顯著性變化，PDTC各組均極顯著減小（P＜0.01）。
　　3.血常規(guī)參數(shù)：PDTC各劑量組與空白對照組比較，用藥后1周PDTC低劑量組WBC顯著降低（P＜

6、0.05），LYM極顯著降低（P＜0.01），GRAN無顯著性變化；PDTC中劑量組WBC、LYM極顯著降低（P＜0.01)，GRAN顯著降低（P＜0.05）；PDTC高劑量組WBC、LYM、GRAN極顯著降低（P＜0.01)。用藥后2周PDTC低劑量組WBC極顯著降低（P＜0.01），LYM、GRAN顯著降低（P＜0.05）；PDTC中劑量組WBC、LYM、GRAN極顯著降低（P＜0.01)；PDTC高劑量組WBC、LYM、GRAN極

7、顯著降低（P＜0.01)。用藥后3、4周PDTC低、中、高劑量組WBC、LYM、GRAN極顯著降低（P＜0.01)。PDTC各劑量組與基礎(chǔ)值比較，PDTC低劑量組用藥2周WBC無顯著性差異，用藥3周GRAN無顯著性差異，用藥1周LYM無顯著性差異；PDTC中劑量組WBC、LYM用藥1周無顯著性差異，GRAN用藥2周無顯著性差異；PDTC高劑量組用藥1周WBC、LYM、GRAN均無顯著性差異。
　　4.促炎細(xì)胞因子IL-6、TNF-

8、α含量：結(jié)果顯示，用藥4周后，空白對照組、生理鹽水組與用藥前比較，IL-6、TNF-α含量均極顯著性升高（P＜0.01)；PDTC低劑量組IL-6極顯著性降低（P＜0.01），而TNF-α含量無顯著性降低；PDTC中劑量組IL-6、TNF-α含量均極顯著性降低（P＜0.01)；PDTC高劑量組IL-6顯著降低（P＜0.05），而TNF-α含量無顯著性降低。
　　5. MMP-9含量：結(jié)果顯示，用藥4周后，PDTC低、中、高劑量組與

9、用藥前比較，MMP-9含量極顯著降低（P＜0.01)。
　　6.腹主動脈病理學(xué)觀察：正常腹主動脈壁無炎性細(xì)胞浸潤，氯化鈣浸潤形成腹主動脈瘤后瘤壁可見大量炎癥細(xì)胞浸潤，浸潤的炎性細(xì)胞主要集中于中膜和外膜；血管中膜彈性纖維降解、斷裂，平滑肌細(xì)胞減少或消失。用藥4周后，空白對照組和生理鹽水組動脈壁炎性細(xì)胞浸潤進一步增多；PDTC各劑量組中膜彈性纖維開始重建，與空白對照組比較，平滑肌細(xì)胞增多，炎性細(xì)胞浸潤減少。
　　結(jié)論：