烏骨雞若干營養(yǎng)與活性成分及其功能研究.pdf

1、烏骨雞(Gallus gallus domesticus Brisson)是我國特有的保健藥用雞種，屬于鳥綱、雞形目、雉科、雞屬動(dòng)物。歷代烏骨雞入藥均以江西泰和產(chǎn)烏骨雞為道地藥材，泰和烏骨雞是江西省重要的地方特色資源。泰和烏骨雞具有的烏皮、烏肉、烏骨等烏色性狀和白色絲狀羽毛是區(qū)別于普通雞的顯著特征。泰和烏骨雞作為藥食兩用的滋補(bǔ)品在中國民間歷史悠久，名揚(yáng)海內(nèi)外，既可單獨(dú)食用，又可配藥入復(fù)方，具有補(bǔ)肝腎、益氣血、養(yǎng)陰清熱、調(diào)經(jīng)健脾、補(bǔ)腎固精

2、等功效，尤其是在增強(qiáng)體力、補(bǔ)血、治療糖尿病和婦科疾病等方面效果顯著。 迄今為止，對(duì)泰和烏骨雞的研究雖已取得了一定成果，但實(shí)驗(yàn)科學(xué)研究基礎(chǔ)薄弱，缺乏充足的科學(xué)證據(jù)來支撐其傳統(tǒng)的功能療效，對(duì)烏骨雞的認(rèn)識(shí)還多停留在經(jīng)驗(yàn)和感性層面。為此，本文以泰和烏骨雞為研究對(duì)象，根據(jù)烏骨雞傳統(tǒng)的用藥經(jīng)驗(yàn)和認(rèn)識(shí)，綜合應(yīng)用食品科學(xué)、中藥學(xué)、藥理學(xué)及現(xiàn)代儀器分析方法等一系列現(xiàn)代研究方法和技術(shù)手段，對(duì)泰和烏骨雞的營養(yǎng)和活性成分及功效進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，試圖

3、從烏骨雞脂類、肽類、礦物元素、核苷、黑色素等營養(yǎng)活性成分在化學(xué)組成、營養(yǎng)價(jià)值和功能活性等的特殊性和有效性方面，來證實(shí)和闡述泰和烏骨雞在滋補(bǔ)藥用方面的本質(zhì)和機(jī)理。現(xiàn)已取得了一些創(chuàng)新性成果，這些結(jié)果有助于加強(qiáng)人們對(duì)烏骨雞滋補(bǔ)營養(yǎng)作用及機(jī)理的認(rèn)識(shí)，還能為烏骨雞的綜合利用及功能食品的開發(fā)提供指導(dǎo)。本文主要結(jié)果概括如下： 1．為從營養(yǎng)學(xué)角度理解烏骨雞的滋補(bǔ)營養(yǎng)作用，以中醫(yī)藥傳統(tǒng)上一般不作藥用并在相同條件下養(yǎng)殖的嶺南黃雞、崇仁麻雞作為對(duì)照，

4、采用現(xiàn)代分析技術(shù)對(duì)泰和烏骨雞總脂質(zhì)營養(yǎng)成分進(jìn)行分析，證實(shí)泰和烏骨雞雞肉具有高含水量、低脂肪、高磷脂含量及多不飽和脂肪酸、必需脂肪酸和花生四烯酸在脂肪酸組成中比例較高的特點(diǎn)，這些特殊性與烏骨雞雞種有直接關(guān)系，使烏骨雞更符合現(xiàn)代營養(yǎng)需求，可能是提供烏骨雞營養(yǎng)和滋補(bǔ)功能的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。 2．依據(jù)烏骨雞的具有補(bǔ)血、益氣、強(qiáng)壯身體等傳統(tǒng)用藥經(jīng)驗(yàn)，采用失血造模和乙酰苯肼聯(lián)用環(huán)磷酰胺造模兩種模型對(duì)烏骨雞補(bǔ)血作用進(jìn)行觀察；發(fā)現(xiàn)泰和烏骨雞的總脂質(zhì)

5、和酶解制得的活性肽I能顯著升高血虛小鼠的紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞積壓、胸腺指數(shù)和體溫，增強(qiáng)小鼠的體力，具有明確的補(bǔ)血作用。證實(shí)它們是烏骨雞臨床補(bǔ)血功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。 3．以普通雞的總脂質(zhì)為對(duì)照，發(fā)現(xiàn)飼喂泰和烏骨雞總脂質(zhì)能夠延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，增強(qiáng)小鼠體力，有抗疲勞作用；發(fā)現(xiàn)飼喂泰和烏骨雞總脂質(zhì)能夠顯著延長(zhǎng)小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間并降低小鼠5 min內(nèi)整體耗氧量，且與體溫變化無關(guān)，烏骨雞總脂質(zhì)有耐缺氧和降低整體耗氧量

6、作用，而對(duì)照雞總脂質(zhì)無相似作用；發(fā)現(xiàn)泰和烏骨雞總脂質(zhì)直接外用于老齡小鼠皮膚表面，能增加皮膚水份和羥脯氨酸含量，具有明顯的延緩皮膚衰老作用。另通過長(zhǎng)期飼喂泰和烏骨雞總脂質(zhì)，發(fā)現(xiàn)泰和烏骨雞總脂質(zhì)不會(huì)造成正常小鼠血脂、膽固醇升高，還有降低總甘油三脂、脂蛋白 A，升高高密度脂蛋白含量作用。 4．通過HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)鑒定了泰和烏骨雞肌肉中肌肽的存在，建立和發(fā)展了一種以氨基柱為分離材質(zhì)的高效液相測(cè)定生物組織中肌肽含量的新方法，測(cè)定并比

7、較了烏骨雞和普通白洛克雞、崇仁麻雞、嶺南黃雞不同肌肉部位中肌肽的含量，證實(shí)泰和烏骨雞中含有較高含量的抗氧化成份“肌肽”，為闡明烏骨雞獨(dú)特的滋補(bǔ)作用提供了依據(jù)。 5．綜合運(yùn)用大孔吸附樹脂分離、溶劑沉淀、高效液相制備層析、ESI-MS、UV、IR、<'1>H-NMR、<'13>C-NMR 等現(xiàn)代分離、純化、結(jié)構(gòu)表征等技術(shù)，從泰和烏骨雞中分離制備鑒定出次黃嘌呤、尿嘧啶、尿嘧啶核苷等化合物。 6．以在相同條件下養(yǎng)殖的嶺南黃雞、崇

8、仁麻雞作為對(duì)照，采用ICP-AES法對(duì)泰和烏骨雞不同組織和部位中的礦物質(zhì)元素進(jìn)行測(cè)定和分布比較，證實(shí)泰和烏骨雞富含Ca、Fe、Cu、Mn、Zn、Se、cr 等元素，并在烏骨雞黑色素中檢出了P、Ca、Fe、Na、As、Al、Cu、K、Zn、Cr、Mg、Pb、Se、Ni、Mn、Co、V、Cd等18種元素。其中Fe、Cu、Cr、Ni、Co、V元素含量要比烏骨雞組織中的要高，推測(cè)烏骨雞黑色素對(duì)這些元素確有富集作用，這些現(xiàn)象與泰和烏骨雞雞種有直接

9、關(guān)系。 7．采用均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)選了烏骨雞蛋白的酶解條件，并建立相應(yīng)的數(shù)學(xué)模型對(duì)烏骨雞蛋白水解程度實(shí)施控制，獲得一系列的烏骨雞低分子肽。 8．通過建立體外抗氧化、抗糖基化測(cè)定體系，證實(shí)由不同酶解條件制得的烏骨雞活性肽Ⅰ、Ⅱ具有抗氧化、抗糖基化的活性；通過對(duì)大鼠頭蓋骨成骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)研究發(fā)現(xiàn)烏骨雞活性肽Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ有促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖的活性，這些發(fā)現(xiàn)為開發(fā)以烏骨雞活性多肽為功能成份的保健產(chǎn)品提供了科學(xué)依據(jù)。 9．運(yùn)用蛋白

10、酶酶解技術(shù)、堿溶酸沉法提取獲得了烏骨雞黑色素，經(jīng)差熱、傅立葉紅外、ESI-MS等技術(shù)分析表明，烏骨雞黑色素應(yīng)為無固定熔點(diǎn)的聚合物。 其分子中應(yīng)存有大量吲哚類結(jié)構(gòu)，可能含有NH-，O=，OH-，C=N，At-等官能團(tuán)。 10．采用高脂飼料喂養(yǎng)，腹腔注射小劑量STZ誘導(dǎo)的方法成功建立了Ⅱ型糖尿病大鼠模型，通過該模型，發(fā)現(xiàn)泰和烏骨雞的黑色素對(duì)Ⅱ型糖尿病模型大鼠具有降糖活性，其機(jī)理可能是通過提高血清總抗氧化能力，清除自由基，減輕脂質(zhì)過氧