64排螺旋CT腎癌灌注成像實(shí)驗(yàn)與臨床應(yīng)用研究.pdf

1、第一部分兔VX2腎移植瘤模型64排螺旋CT灌注成像研究研究目的建立兔VX2腎移植瘤模型,通過(guò)對(duì)兔VX2腎移植瘤模型的64排螺旋CT灌注成像,探討兔VX2腎移植瘤血流動(dòng)力學(xué)變化規(guī)律,為研究人類腎癌提供理論依據(jù)。
　　 材料與方法：
　　 1主要儀器與試劑Brilliance64排螺旋CT掃描儀(荷蘭PHILIPS公司),配置有Mxview(帶有腎臟灌注軟件)工作站,雙筒高壓注射器(美國(guó)MEDRAD公司)；非離子型對(duì)比劑典比

2、樂(lè)(370mgI/ml)。
　　 2實(shí)驗(yàn)資料
　　 2.1實(shí)驗(yàn)對(duì)象分組20只新西蘭大白兔,體重2-2.5kg,雌雄不限。隨機(jī)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組。
　　 2.2兔VX2腎移植瘤模型的建立.
　　 2.3CT灌注成像技術(shù)與方法
　　 3圖像后處理、數(shù)據(jù)收集及觀察
　　 觀察TDC形態(tài)并收集、記錄實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組BF、BV、MTT灌注參數(shù)。
　　 4病理學(xué)觀察
　　

3、常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色,顯微鏡下觀察正常腎及腫瘤的組織結(jié)構(gòu)。
　　 5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　 采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各項(xiàng)灌注參數(shù)指標(biāo)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,數(shù)據(jù)采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),P<0.05,被認(rèn)為顯著性差異。
　　 結(jié)果
　　 1兔VX2腎移植瘤模型大體形態(tài)及病理學(xué)觀察10只新西蘭大白兔均成功長(zhǎng)出腫瘤,大小范圍0.6-1.4cm,最小者直徑0.6cm,邊緣光滑,密度均勻；最大者直徑

4、1.4cm,邊緣大部分光滑,小部分欠光整,中央部見(jiàn)小片壞死區(qū),部分瘤體突出于腎包膜之外。
　　 VX2移植瘤組HE染色見(jiàn)腫瘤細(xì)胞核大、異型、深染,呈混亂簇狀及乳頭狀排列；對(duì)照組腎組織HE染色可見(jiàn)基本正常的腎小球及腎小管,結(jié)構(gòu)基本規(guī)則,細(xì)胞形態(tài)良好。
　　 2時(shí)間-密度曲線(TDC)特征主動(dòng)脈TDC:依據(jù)先后分為基線段、上升段、下降段及水平段4階段。基線段較平直；然后驟然上升形成波峰,上升段和下降段表現(xiàn)為驟升驟降；然后是較

5、平直并緩慢下降的水平段。
　　 腎靜脈TDC:基線段較平直,維持時(shí)間較長(zhǎng);然后大約在主動(dòng)脈峰值之后上升形成波峰,并下降較快,表現(xiàn)為速升速降；波峰明顯低于主動(dòng)脈,時(shí)間跨度長(zhǎng)于主動(dòng)脈；之后緩慢下降,也可見(jiàn)到小的再循環(huán)峰。
　　 正常對(duì)照組腎臟TDC:基線段較主動(dòng)脈的TDC稍長(zhǎng),上升段較陡,但陡度小于主動(dòng)脈,達(dá)到峰值后緩慢上升一段時(shí)間再緩慢下降,表現(xiàn)為速升速降,然后是較平直并緩慢下降的水平段。
　　 移植瘤組TDC:與

6、正常組相似,但開始上升時(shí)間向后推移,上升速率減慢,上升段明顯平緩,幅度減低,且峰值出現(xiàn)時(shí)間遲于正常腎皮質(zhì)。
　　 3正常對(duì)照組、移植瘤組BF、BV、MTT灌注參數(shù)比較正常對(duì)照組BF、BV、MTT分別是(114.2±58.6)ml/(min.100mg)、(107.9±99.1)ml/100mg、(22.4±19.1)s,移植瘤組BF、BV、MTT分別是(24.6±14.3)ml/(min.100mg)、(106.7±64.5)m

7、l/100mg、(40.9±13.1)s。兩組BF、MTT比較,參考值P<0.05,被認(rèn)為顯著性差異；兩組BV比較、參考值P>0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)顯著性意義結(jié)論1通過(guò)采用切開后腹壁直接包埋種植法,可獲得穩(wěn)定的兔VX2腎移植瘤模型。
　　 2兔VX2腎移植瘤模型CT灌注參數(shù)BF低于正常腎皮質(zhì),MTT則高于正常腎皮質(zhì),CT灌注在一定程度上能反映出VX2移植瘤的血流動(dòng)力學(xué)變化規(guī)律,為研究人類腎癌提供理論依據(jù)。
　　 第二部分腎細(xì)

8、胞癌64排螺旋CT灌注成像與MVD及VEGF的相關(guān)性研究研究目的利用64排CT灌注成像技術(shù),探討腎細(xì)胞癌血流動(dòng)力學(xué)變化規(guī)律,重點(diǎn)為腎癌BF、BV、MTT等CT灌注參數(shù)與腫瘤微血管密度(MVD)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)之間的關(guān)系。
　　 材料與方法：
　　 1主要儀器與試劑同第一部分。
　　 2研究對(duì)象
　　 正常對(duì)照組10例:分左、右腎兩組。
　　 腎細(xì)胞癌組15例:均經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)為腎細(xì)胞

9、癌,病理類型:透明細(xì)胞癌8例,顆粒細(xì)胞癌4例,乳頭狀癌3例；腎細(xì)胞癌組與同側(cè)癌旁腎皮質(zhì)(距離腫瘤邊緣2.0cm以上)作為比較。
　　 3掃描方案及參數(shù).
　　 4圖像后處理及數(shù)據(jù)收集同第一部分。
　　 5病理檢查和免疫組化觀察方法
　　 6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　 所有計(jì)數(shù)資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,兩兩樣本均數(shù)的比較用t檢驗(yàn)；多個(gè)樣本均數(shù)的比較用方差分析。等

10、級(jí)資料的比較用非參數(shù)檢驗(yàn),對(duì)于腎癌實(shí)質(zhì)BF與MVD和VEGF表達(dá)之間的關(guān)系分別采用Pearson相關(guān)分析和Spearman’s相關(guān)分析法。P<0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異。
　　 結(jié)果
　　 1TDC形態(tài)
　　 1.1主動(dòng)脈及腎靜脈TDC形態(tài):同第一部分,形態(tài)較實(shí)驗(yàn)兔腎高聳。
　　 1.2正常腎臟TDC形態(tài)表現(xiàn)腎皮質(zhì)TDC呈速升緩降型,峰值出現(xiàn)在主動(dòng)脈峰值之后,上升段的形態(tài)與主動(dòng)脈類似,但較主動(dòng)脈平緩,幅

11、度低,下降段在快速輕度下降后,維持緩慢下降的平臺(tái)期。
　　 1.3腎癌TDC形態(tài)表現(xiàn)依據(jù)腎癌CT灌注的TDC形態(tài)不同將15例腎癌分為富血供和乏血供兩型,其中8例為富血供腎癌,判斷標(biāo)準(zhǔn)為:瘤體TDC形態(tài)類似于主動(dòng)脈TDC,曲線上升幅度及陡峭程度均稍低于腹主動(dòng)脈,上升段呈較陡的上升型曲線,而下降段不明顯,水平段延長(zhǎng)；7例為乏血供型腎癌,判斷標(biāo)準(zhǔn)為:腫瘤實(shí)質(zhì)TDC曲線與腹主動(dòng)脈TDC明顯不同,曲線上升幅度及陡峭程度明顯低于腹主動(dòng)脈,上

12、升段較緩慢,下降段不明顯,有的可呈波浪狀。
　　 2正常左、右側(cè)腎皮質(zhì)灌注參數(shù)比較左側(cè)腎皮質(zhì)BF(182.99±25.89)ml/(min.100mg)、BV(109.74±13.07)ml/100mg、MTT(9.50±3.13)s；右側(cè)腎皮質(zhì)BF(190.68±33.68)ml/(min.100mg)、BV(122.84±19.75)ml/100mg、MTT(8.70±3.30)s。左、右腎皮質(zhì)灌參數(shù)BF、BV、MTT比較,

13、P>0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)顯著性差異。
　　 3腎癌組與同側(cè)癌旁腎皮質(zhì)灌注參數(shù)比較腎癌組BF(133.0±29.9)ml/(min.100mg)、BV(107.2±23.1)ml/100mg、MTT(15.6±6.5)s,同側(cè)癌旁腎皮質(zhì)組BF(166.1±26.0)ml/(min.100mg)、BV(84.8±31.6)ml/100mg、MTT(11.3±3.3)s,兩組間P<0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異。
　　 4CT灌注

14、參數(shù)與MVD、VEGF的關(guān)系4.1腎癌和同側(cè)癌旁腎皮質(zhì)VEGF的表達(dá)15例腎癌組織中VEGF表達(dá)陽(yáng)性者12例,同側(cè)癌旁腎皮質(zhì)組織則無(wú)VEGF陽(yáng)性表達(dá),經(jīng)非常參數(shù)檢驗(yàn),兩組間P<0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異。
　　 4.2腎癌和同側(cè)癌旁腎皮質(zhì)中CD34的表達(dá)腎癌組織與同側(cè)癌旁腎皮質(zhì)MVD在200倍視野下測(cè)量值分別為:122.2±25.4條、28.2±14.7條。經(jīng)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),兩組間P<0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異。
　　

15、 5CT灌注成像參數(shù)值、VEGF及MVD的相關(guān)性5.1VEGF的表達(dá)與MVD之間的相關(guān)性VEGF表達(dá)陽(yáng)性的腎癌病人的MVD值明顯高于VEGF表達(dá)陰性者,經(jīng)Spearman相關(guān)分析VEGF表達(dá)和MVD之間呈正相關(guān)(r=0.870,P=0.000)。
　　 5.2腎癌CT灌注參數(shù)值BF、MTT與MVD的相關(guān)性對(duì)腎癌組中MVD和BF、MTT的采用Pearson相關(guān)分析,發(fā)現(xiàn)腫瘤實(shí)質(zhì)的BF值與MVD呈正相關(guān)(r值為r=0.565,P=

16、0.028),MTT與MVD呈負(fù)相關(guān)(r值為r=-0.878,P=0.000)。
　　 5.3腎癌組CT灌注參數(shù)值BF與VEGF的相關(guān)性對(duì)腎癌組中的VEGF和BF經(jīng)Spearman相關(guān)分析,(P=0.06>0.05),統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明VEGF表達(dá)和灌注參數(shù)值BF之間尚不能認(rèn)為有相關(guān)性。
　　 結(jié)論
　　 1腎細(xì)胞癌CT灌注參數(shù)與癌旁腎皮質(zhì)比較BF減低,而BV增高,MTT延長(zhǎng)。CT灌注參數(shù)可以反映出腎癌組織血流動(dòng)力學(xué)與