圍產(chǎn)期服用OMEGA-3多不飽和脂肪酸改善七氟烷導(dǎo)致的新生大鼠神經(jīng)退行性病變和記憶損害.pdf

1、近年來(lái)許多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，新生動(dòng)物吸入七氟烷等麻醉氣體能導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，影響神經(jīng)細(xì)胞的增生和分化，從而損害神經(jīng)認(rèn)知功能。OMEGA-3多不飽和脂肪酸作為一類重要的不飽和脂肪酸，在腦內(nèi)含量極為豐富，在維持腦的結(jié)構(gòu)和功能上具有極為重要的作用。以往的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，OMEGA-3多不飽和脂肪酸具有抗凋亡，抗氧化和改善神經(jīng)發(fā)生的作用。本實(shí)驗(yàn)將觀察七氟烷是否能對(duì)未成熟腦產(chǎn)生明顯的神經(jīng)毒性作用，且圍產(chǎn)期服用含豐富OMEGA-3多不飽和脂肪酸的魚(yú)油是否能

2、改善七氟烷導(dǎo)致新生大鼠的神經(jīng)毒性和認(rèn)知損害。
　　斯普拉格-杜勒(SD)孕鼠（每組3只）從懷孕第二天（懷孕期）開(kāi)始到分娩后14天（哺乳期）服用含魚(yú)油或不含魚(yú)油的食物。其新生大鼠在出生后第7天給予吸入麻醉藥七氟烷干預(yù)（母鼠沒(méi)有魚(yú)油干預(yù)，新生鼠也沒(méi)有進(jìn)行七氟烷干預(yù)的為對(duì)照組）。每組的新生大鼠在麻醉剛開(kāi)始的時(shí)候和麻醉后持續(xù)3天內(nèi)定時(shí)腹腔注射BrdU，以評(píng)估海馬區(qū)的神經(jīng)增生。其后每組新生大鼠在指定的時(shí)間分別取腦組織和灌注固定，冰凍切片。各

3、組在麻醉后3小時(shí)（每組3只）用流式細(xì)胞術(shù)的方法分析各組細(xì)胞活性氧(ROS)的相對(duì)水平;在麻醉后18小時(shí)進(jìn)行用免疫蛋白印記的方法和免疫熒光的方法檢測(cè)腦組織內(nèi)活化型半胱天冬酶-3(cleavedcaspase-3)的變化;在麻醉后3天觀察各組BrdU的含量。剩余新生大鼠（每組9只）則分別在出生后5周，9周和10周的時(shí)候行莫里斯(Morris)水迷宮空間學(xué)習(xí)記憶、場(chǎng)景恐懼實(shí)驗(yàn)和莫里斯水迷宮強(qiáng)化記憶實(shí)驗(yàn)。
　　實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，3％七氟烷6小時(shí)持

4、續(xù)吸入能導(dǎo)致新生大鼠大腦的丘腦區(qū)，頂葉皮層區(qū)活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)明顯的增多，但在海馬區(qū)卻沒(méi)看到明顯差異。且在皮層區(qū)中，我們進(jìn)而發(fā)現(xiàn)七氟烷能導(dǎo)致細(xì)胞活性氧(ROS)的增多。七氟烷還能降低海馬齒狀回區(qū)的BrdU標(biāo)記陽(yáng)性的神經(jīng)前體細(xì)胞。然而，我們發(fā)現(xiàn)圍產(chǎn)期服用魚(yú)油能明顯降低新生大鼠皮層區(qū)活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)和細(xì)胞活性氧(ROS)，且改善海馬區(qū)齒狀回BrdU標(biāo)記陽(yáng)性的神

5、經(jīng)前體細(xì)胞。在行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中，雖然各組新生鼠成年后在莫里斯水迷宮空間學(xué)習(xí)記憶和莫里斯水迷宮強(qiáng)化記憶實(shí)驗(yàn)中的早期長(zhǎng)期記憶了測(cè)驗(yàn)中沒(méi)有明顯差異，但是我們發(fā)現(xiàn)七氟烷能明顯損傷新生大鼠成年后對(duì)場(chǎng)景恐懼的即刻反應(yīng)、莫里斯水迷宮強(qiáng)化記憶實(shí)驗(yàn)中的工作記和短期記憶，并且魚(yú)油能明顯改善七氟烷造成的學(xué)習(xí)記憶損傷。
　　我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了新生鼠吸入七氟烷能造成神經(jīng)細(xì)胞氧化，凋亡和降低神經(jīng)新生，最終導(dǎo)致成年時(shí)場(chǎng)景恐懼的即刻反應(yīng)、莫里斯水迷宮強(qiáng)化記憶實(shí)驗(yàn)中的工