雞馬立克氏病病毒蝕斑快速檢測方法的研究.pdf

1、雞馬立克氏病(Marek's disease MD)是由皰疹病毒引起的一種淋巴組織增生性疾病。該病廣泛流行是嚴重危害家禽的傳染病之一，目前活疫苗免疫仍是預防該病的主要手段。疫苗的效價和免疫效果，是成功的預防該病發(fā)生的關(guān)鍵，馬立克氏病疫苗的配制和檢測國內(nèi)和國外都采用病毒蝕斑數(shù)目作為疫苗效價的主要指標，如進行疫苗蝕斑的測定，已有檢測方法需要4-6天時間，所以在疫苗分裝之前無法確定所收獲毒液中的蝕斑數(shù)以及進行疫苗的配制。這樣就使得在MD疫苗，

2、尤其是多價疫苗生產(chǎn)中，在疫苗配制環(huán)節(jié)上存在著很大的盲目性，同樣在疫苗的使用過程中，疫苗的毒價時常會發(fā)生變化，特別需要對疫苗的效價進行檢測，傳統(tǒng)方法需時長的特點是遠遠不能滿足快速檢測的要求。因此建立快速的病毒蝕斑檢測方法是非常必要的。 本文以間接免疫熒光技術(shù)(IFA)為基礎(chǔ)，并加以改進，根據(jù)12批次MDV1、12批次MDV2及12批次MDV3毒液在雙變量(FAC+/ml，PFU/ml)下的數(shù)據(jù)，獲得二維正態(tài)直線回歸方程：MDV1：

3、Yi=0.1061Xi-11.38；MDV2：Yi=0.1158Xi+0.5867MDV3：Yi=0.14118Xi+13.18.其中，Yi=PFU/mlXi=FAC+/ml。統(tǒng)計學理論檢驗證明二維正態(tài)直線回歸方程能客觀反映出疫苗熒光陽性細胞數(shù)與蝕斑數(shù)的相互關(guān)系，利用所建立的回歸方程，通過計數(shù)熒光陽性細胞數(shù)(FAC+)可快速的估計出疫苗中的蝕斑(PFU)數(shù)。在此基礎(chǔ)上，建立了一種快速檢測馬立克氏病病毒蝕斑的方法，將該方法運用于三價疫苗的