畜禽微生態(tài)制劑布拉氏酵母菌的制備研究.pdf

1、布拉氏酵母菌（Saccharomyces boulardii）是從印尼荔枝中分離出來的一種酵母類益生菌，其藥物制劑療效諸多，不僅可以有效抑制病原菌的生長(zhǎng)和降解細(xì)菌毒素，還能維持腸道微生態(tài)平衡，并且增強(qiáng)機(jī)體免疫力。在治療人和動(dòng)物的各種腹瀉中得到了廣泛應(yīng)用，且取得了良好的治療效果。布拉氏酵母菌制劑治療動(dòng)物腹瀉是未來畜牧業(yè)發(fā)展的必然趨勢(shì)，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中具有廣闊的應(yīng)用前景。本文先對(duì)Saccharomyces boulardii的培養(yǎng)基進(jìn)行了篩選

2、，并對(duì)麥芽汁培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，以期得到高濃度的菌體發(fā)酵液。接著制備了三種布拉氏酵母菌的微生態(tài)劑型，分別是凍干菌粉、中空海藻酸鈣微膠囊和凍干微膠囊。
　　本文主要內(nèi)容和研究結(jié)果如下：
　　1.布拉氏酵母菌培養(yǎng)基的篩選和培養(yǎng)條件的優(yōu)化。
　　對(duì)常用的6種酵母菌培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，確定出產(chǎn)布拉氏酵母菌（Saccharomyces boulardii）高且適合工業(yè)生產(chǎn)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是麥芽汁培養(yǎng)基。為了進(jìn)一步提高布拉氏酵母菌

3、的產(chǎn)量，進(jìn)一步對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明：培養(yǎng)溫度為32℃，培養(yǎng)基pH自然、麥芽汁糖濃度為10 Brix、裝液量100 mL/500 mL、接種量為2％的條件下得到的菌體量最大。
　　2.高活性布拉氏酵母菌凍干菌粉的制備。
　　為了得到高活性布拉氏酵母菌（Saccharomyces boulardii）菌粉，以布拉氏酵母菌菌粉的活菌量為指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)方法優(yōu)化得出最佳凍干保護(hù)劑配方為：脫脂奶粉（10%）、海藻糖（12%

4、）、甘油（6%）、蔗糖（10%）。保護(hù)劑與菌體的最佳混合條件是：保護(hù)劑pH為5，保護(hù)劑與菌泥的混合比例為2:1，平衡時(shí)間60 min。在此條件下經(jīng)過凍干所得到得菌活量最大，達(dá)到1.96×1010 cfu/g。
　　3.中空海藻酸鈣微膠囊的制備。
　　為了得到粒徑較小、形狀較規(guī)則、機(jī)械強(qiáng)度和包埋產(chǎn)率較高的液心微膠囊，對(duì)其制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，其優(yōu)化結(jié)果為：CaC12溶液的濃度為2%，CMC濃度2%，滴加速度為60-80滴/min，

5、海藻酸鈉濃度1.2%（w/v），成膜反應(yīng)時(shí)間15 min，固化20 min，過濾獲得粒徑均勻、機(jī)械強(qiáng)度較高的中空海藻酸鈣微膠囊。其活菌數(shù)為1.2×108 cfu/g，包埋產(chǎn)率是87%。該微膠囊在人工胃液、人工腸液、人工膽汁、高滲透壓環(huán)境下具有較好的耐受性，但是在存儲(chǔ)過程中性質(zhì)不穩(wěn)定。
　　4.凍干微膠囊的制備。
　　為了得到便于儲(chǔ)藏運(yùn)輸?shù)牟祭辖湍妇⒛z囊，本試驗(yàn)進(jìn)一步研究制備了凍干布拉氏酵母菌微膠囊。以凍干微膠囊的包埋產(chǎn)率

6、為指標(biāo)，對(duì)其制備工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，優(yōu)化結(jié)果為：海藻酸鈉濃度2%、CaCl2濃度1%、乳化時(shí)間10 min，固化時(shí)間15 min，得到包埋產(chǎn)率為67%，活性為7.9×107 cfu/g的乳化微膠囊。按照優(yōu)化的工藝條件，加入凍干保護(hù)劑，進(jìn)行真空冷凍干燥，得到凍干微膠囊，測(cè)定其活性為7.2×107 cfu/g。對(duì)凍干膠囊在人工胃液、人工腸液、人工膽汁、高滲透壓環(huán)境下進(jìn)行耐受性試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明凍干膠囊具有較好的耐受性。并且在存儲(chǔ)過程中凍干微膠