山葡萄花色苷生物合成轉(zhuǎn)錄因子Vamyb2基因cDNA的克隆與分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、山葡萄是我國重要的野生資源,果實中有黃酮類、單寧類、苯丙素類等多種代謝產(chǎn)物,本文對山葡萄花色苷生物合成過程中的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子展開研究。
  試驗采用SDS法、Trizol法和改良CTAB法三種RNA提取方法,提取山葡萄果皮和葉片的總RNA。結(jié)果表明:改良CTAB法所提取山葡萄葉片和果皮的總RNA帶形完整,28S rRNA和18S rRNA的熒光亮度接近2:1,OD260/OD280值介于1.8~2.0之間,該方法提取的總RNA純度和

2、提取量最高。
  試驗采用RT-PCR、SMARTTMRACE技術從山葡萄成熟果皮中克隆得到了轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Vamyb2基因的cDNA全長序列,生物信息學結(jié)果表明,其編碼171個氨基酸,分子量為19.47KDa,等電點值為6.15。不穩(wěn)定指數(shù)為30.56,是穩(wěn)定蛋白質(zhì);多序列比對與歐亞種葡萄、雜交種葡萄相似性均達到99%;分子進化樹結(jié)果表明,與美洲種葡萄和雜交種葡萄親緣關系近,與擬南芥、金魚草等轉(zhuǎn)錄因子親緣關系較遠;該基因無信號肽,

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