經(jīng)血液途徑感染HIV-1人群合并隱匿性HBV感染的特點及其影響因素.pdf

1、背景：艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS),是人體感染人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的慢性傳染性疾病,其特征是HIV特異性地侵犯和破壞CD4+T淋巴細(xì)胞,造成機體免疫系統(tǒng)進(jìn)行性破壞,最終導(dǎo)致各種機會性感染和腫瘤的發(fā)生。自1996年高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療(HAART)問世以來,它已成為目前惟一對艾滋病有效的治療有段。近年來由于抗病毒治療的開展,艾滋病患者的病死率已顯著下降,但目前國內(nèi)抗病毒治療仍存在一系列嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)和困難。
　　

2、 HIV與HCV、HBV具有相似或相同的傳播途徑,三者均可經(jīng)靜脈注射吸毒、血液及血制品輸入、性接觸和母嬰垂直感染等途徑傳播,因此,易造成HIV、HBV、HCV三者的合并感染。既然HBV、HCV及HIV有著類似的傳播途徑,理論上講,HIV感染人群中HBV或HCV的感染率均應(yīng)該高于正常健康人群中的感染率,但有關(guān)研究報道的HIV感染人群中合并HBV的感染率與HIV感染人群中合并HCV的感染率相差卻很大。而且有趣的是既往研究報道HIV人群合并H

3、CV的感染率顯著高于普通人群中的感染率,但經(jīng)血液途徑HIV感染者合并HBV的感染率卻低于普通人群中的感染率,分析其中原因,可能和HBV的隱匿性感染有關(guān)。
　　 隱匿性HBV感染(OBI)定義為:HBsAg陰性,HBV DNA陽性,伴或不伴HBV抗體陽性。OBI的發(fā)病機制復(fù)雜多樣,目前尚不十分清楚,通常認(rèn)為與HBV本身的基因突變、持續(xù)低水平復(fù)制、HBsAg分泌障礙和宿主免疫應(yīng)答異常、外周血單個核細(xì)胞功能異常等相互影響及其他病毒感染

4、干擾有關(guān)。OBI根據(jù)HBV抗體水平不同分為兩種:血清學(xué)陰性O(shè)BI與血清陽性O(shè)BI,這兩類OBI患者HBV復(fù)制的機制不盡相同:抗HBc陽性患者主要是通過T細(xì)胞的免疫記憶功能介導(dǎo)的,而抗HBc陰性的患者主要是HBV感染后,HBV特異性T細(xì)胞沒有相應(yīng)增加,保護(hù)記憶功能不全引起低水平的感染。另外,不同的發(fā)病因素導(dǎo)致OBI的臨床模式不同:1)感染HBV后恢復(fù)期狀態(tài):持續(xù)攜帶anti-HBs;2)慢性肝炎狀態(tài):這種狀態(tài)下的OBI和病毒變異有關(guān),病毒

5、變異后HBV的感染無法用現(xiàn)有的試劑檢測到,感染持續(xù)存在,可發(fā)展為肝硬化或肝細(xì)胞癌(HCC),這也是不明原因肝病的原因之一;3)健康攜帶狀態(tài)的慢性HBV感染:抗HBc陽性,伴或不伴抗Hbe;4)慢性肝炎或健康攜帶者狀態(tài):HBV血清學(xué)標(biāo)志物全陰性,僅HBVDNA陽性。
　　 國內(nèi)外已有獻(xiàn)血人群合并隱匿性HBV感染、長期透析人群合并隱匿性HBV感染、慢性乙型肝炎人群合并隱匿性HBV感染及不明原因肝病人群合并隱匿性HBV感染的研究。目前

6、針對HIV感染人群合并隱匿性HBV感染的研究主要集中在分子流行病學(xué)研究上,而對其相關(guān)影響因素的研究非常有限,諸如,是否存在HBV基因組的變異、是否合并HCV感染、HIV病毒載量高低、HBV基因型差異以及感染者的性別差異、傳播途徑差異等,都尚無定論。另外,HIV人群中多種病毒的混合感染可以導(dǎo)致體內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞計數(shù)明顯減低,病毒復(fù)制的中間體也可能相互影響,從而導(dǎo)致病毒生活周期的改變,使HIV感染者臨床表現(xiàn)復(fù)雜化,這給HIV/AIDS患

7、者抗病毒治療帶來了新的挑戰(zhàn)。目前,有關(guān)HIV/HBV/HCV混合感染對HAART治療療效的影響以及HAART治療對病毒復(fù)制之間相互關(guān)系的相關(guān)報道較少。目的本研究主要目的是調(diào)查分析經(jīng)血液途徑感染HIV-1人群中OBI的特點,從不同年齡分層、性別、不同HBV血清學(xué)類型、不同CD4計數(shù)分層、HBV S區(qū)變異及HBV基因型、合并HCV感染情況等多層面分析隱匿性HBV感染的影響因素。并對該人群合并HBV/HCV感染情況進(jìn)行分析,了解該人群合并HB

8、V/HCV感染的特點。對隨訪人群進(jìn)行前瞻性研究,觀察經(jīng)血液途徑感染HIV者合并HBV和(或)HCV后對HAART治療療效的影響。
　　 材料和方法：
　　 1.187例HIV感染者均來自河南某艾滋病治療示范區(qū),確認(rèn)在1988年至1995年之間經(jīng)血液途徑感染HIV,于2000年至2005年之間在當(dāng)?shù)丶膊】刂浦行淖鲞^確證試驗(用Western blot法確認(rèn)抗-HIV-1陽性),未接受過抗病毒治療。應(yīng)用ELASA法對經(jīng)血液途

9、徑感染HIV患者的血漿進(jìn)行HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV檢測,對HBsAg陰性者的血漿應(yīng)用吸附柱法抽提HBV DNA,用巢式PCR法對HBV S、C、X區(qū)進(jìn)行擴增,凡2個及2個以上區(qū)段擴增陽性的標(biāo)本診斷為隱匿性HBV感染。對經(jīng)血液途徑感染HIV-1人群合并隱匿性HBV感染情況及該人群合并HBV/HCV感染情況進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 2.對經(jīng)血液途徑感染HW-1人群HBsAg陰性患者,應(yīng)用流式

10、細(xì)胞儀檢測CD4+T淋巴細(xì)胞計數(shù);應(yīng)用熒光定量PCR檢測血漿HCV RNA;設(shè)計引物對合并OBI者HBV pre-S/S區(qū)進(jìn)行擴增,對擴增產(chǎn)物進(jìn)行電泳,對部分PCR擴增產(chǎn)物進(jìn)行直接測序,進(jìn)而進(jìn)行HBV基因分型和HBsAg“α”抗原決定簇變異分析。從不同年齡分層、性別、不同HBV血清學(xué)類型、不同CD4計數(shù)分層、HBsAg“α”抗原決定簇變異及HBV基因型、合并HCV感染情況等多方面進(jìn)行分析,探討HIV人群合并OBI感染的影響因素。

11、　　 3.對研究人群中CD4+T淋巴細(xì)胞計數(shù)為100～350 cells/mm3、無艾滋病相關(guān)的機會性感染或腫瘤、未接受過西藥抗病毒治療的HIV患者進(jìn)行初始HAART治療并進(jìn)行前瞻性研究,隨訪1年。HAART治療方案為:AZT+DDI+NVP。對HBV和HCV不進(jìn)行相應(yīng)的抗病毒治療。隨訪1年時仍繼續(xù)AZT+DDI+NVP方案并繼續(xù)隨訪者123例,為最終納入統(tǒng)計學(xué)范圍的患者,共123例。將123例患者按HIV、HBV、HCV感染情況分為

12、:單純HIV陽性組、HIV+HCV陽性組、HIV+HCV+HBsAg陽性組。對三組患者抗病毒治療前基線、抗病毒治療1個月、3個月、6個月、9個月及12個月時CD4+T淋巴細(xì)胞計數(shù)、HIV RNA載量、HCV RNA載量及HBV DNA載量進(jìn)行比較。HIV RNA載量、HCV RNA載量及HBV DNA載量均采用熒光PCR定量檢測。
　　 結(jié)果：
　　 1.187例HIV-1感染者中,平均年齡(40.3±6.6)歲,其中男

13、性118例,平均年齡(40.66±6.74)歲;女性69例,平均年齡(39.42±8.28)歲,男、女患者平均年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=1.495,P＜0.05)。全部患者肝功能ALT(54.0±24.1)U/L,AST(45.2±21.2)U/L,TBIL(9.9±5.0)μmol/L,男、女患者肝功能比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=1.018、0.963、0.734,p=0.309、0.335、0.463)。
　　 2.187

14、例HW-1感染者HBV血清學(xué)類型及構(gòu)成比如下:HBsAg陽性9例(4.81％);HBV標(biāo)志物全陰性35例(18.71%);單獨HbsAb陽性48例(25.67%);HBsAb/HBcAb陽性6例(3.21%):HBsAb/HBeAb/HBcAb陽性7例(3.74%):HBeAb/HBcAb陽性31例(16.58%):單獨HBcAb陽性51例(27.27%)。
　　 3.187例HIV-1感染者中,抗-HCV陽性143例(76.4

15、7%),平均年齡(39.90±6.92)歲;抗-HCV陰性44例(23.53%),平均年齡(41.18±8.61)歲,抗-HCV陽性及抗-HCV陰性患者的年齡、性別比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4.187例HIV-1感染者中,HW-1/HBV/HCV三重感染者6例(3.21%),其中男性6例,女性3例。其中HBV血清學(xué)模式4例為HBsAg/HBeAg/HBcAb陽性,1為例為HBsAg/HBcAb陽性,1例為HB

16、sAg/HBeAb/HBcAb陽性。
　　 5.應(yīng)用巢式PCR對178例HBsAg陰性HIV感染者的血漿進(jìn)行HBV S、C、X區(qū)擴增,擴增結(jié)果具體如下:S區(qū)擴增陽性35例,C區(qū)擴增陽性45例,X區(qū)擴增陽性54例。其中3個區(qū)同時陽性者19例;2個區(qū)同時陽性者34例;其中S和C陽性3例,S和X區(qū)陽性10例,C和X區(qū)陽性21例;僅1個區(qū)域陽性者9例:其中S區(qū)陽性3例,C區(qū)陽性2例,X區(qū)陽性4例。擴增全陰性標(biāo)本116例。根據(jù)隱匿性HBV

17、感染巢式PCR診斷要求,2個或2個以上區(qū)段擴增陽性可以診斷為隱匿性HBV感染。本研究中178例HBsAg陰性的HIV感染者合并隱匿性HBV感染者53例,未合并HBV感染者125例,有償獻(xiàn)血人群HIV感染者中隱匿性HBV感染率為29.78%。
　　 6.178例HBsAg陰性HW患者,平均年齡(40.13±6.52)歲。其中男性117例,平均年齡(40.65±6.76)歲:女性61例,平均年齡(39.15±8.70)歲,男、女患者

18、年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=1.718,P=0.086)。男、女患者肝功能ALT、AST、TBIL比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=0.947、0.912、0.843,P=0.344、0.362、0.399)。
　　 7.178例HBsAg陰性HIV患者,按年齡分為＜35歲組,35～＜50歲組,≥50歲組。不同年齡分組患者合并OBI感染差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=5.761,P=0.056)。不同性別患者合并隱匿性HBV感染率差異無無統(tǒng)

19、計學(xué)意義(X2=1.161,P=0.688)。
　　 8.178例HBsAg陰性HIV患者,HBV血清學(xué)標(biāo)志物全陰性者35例,合并OBI7例(20%);HBsAb陽性61例,合并OBI14例(22.95%);單獨HBsAb陽性48例,合并OBI10例(20.83%);HBcAb陽性95例,合并OBI36例(37.89%);單獨HBcAb陽性51例,合并OBI21例(41.18%),采用方差分析,各組OBI率差別有統(tǒng)計學(xué)意義(x2

20、=10.797,P=0.029)。
　　 9.178例HBsAg陰性HIV患者,按CD4+T淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)水平分為:＜100cells/mm3組、100～＜200 cells/mm3組、200～＜350 cells/mm3組、≥350 cells/mm3組。其中＜100 cells/mm3者13例,合并OBI者6例(46.15%);100～＜200 cells/mm3者51例,合并OBI者21例(41.18%);200～＜35

21、0 cells/mm3者96例,合并OBI者23例(23.96%);≥350 cells/mm3者18例,合并OBI者3例(16.67%),不同CD4+T淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)水平患者OBI率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=7.871,P=0.049)。
　　 10.經(jīng)血液途徑感染HIV-1人群合并OBI患者HBV基因型分布以C型為主,與當(dāng)?shù)豀BV基因型分布一致。OBI患者HBsAg“α”抗原決定簇與標(biāo)準(zhǔn)株比對,發(fā)現(xiàn)1例存在P135F突變,

22、1例存在N146K、C147L,未見既往報道中所見突變位點。
　　 11.178例HBsAg陰性HIV患者,按是否合并HCV分為抗HCV陽性組和抗HCV陰性組,2組患者年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=0.005,P=0.966);性別比例比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=0.659,P=0.417);ALT、AST水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=2.894、3.972,P=0.004、＜0.001);TBIL水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=

23、0.359,P=0.719);HBV-M均陰性、單獨HBsAb陽性、單獨抗-HBc陽性、HBsAb及HBcAb均陽性及HBV DNA陽性率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=3.111、0.251、0.492、0.006,P=0.078、0.251、0.492、0.939)。2組患者合并OBI分別為42例(30.66%)、11例(26.83%),比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=0.221,P=0.638)。按HCV RNA載量(copies/mL

24、)不同分為＞5×105組、5×102～5×105組、＜5×102組,不同HCV RNA載量組之間OBI率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=0.115,P=0.944)。
　　 12.178例HBsAg陰性HIV患者,按是否合并OBI分為合并OBI組和未合并OBI組,2組間男女比例比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=0.304,P=0.761);年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=1.756,P=0.185);ALT比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=2.77

25、4,P=0.006),但AST、TBIL比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=1.898、0.834,P=0.058、0.405)。2組間單獨HBcAb陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=4.444,P=0.035),其余HBV血清學(xué)模式比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。2組間CD4+T細(xì)胞絕對計數(shù)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=3.912,P＜0.001)。2組間抗HCV陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=0.161,P=0.688)。
　　

26、13.123例完成HAART1年治療者,分為單純HIV陽性組(A組)、HIV+HCV陽性組(B組)、患者抗HIW抗HCV/HBsAg陽性組(C組)。各組內(nèi)CD4+T計數(shù)HAART治療12月時較基線時升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=5.020、10.715、2.611,P均＜0.01);3組間相同時間點CD4+T計數(shù)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=1.609、1.871、0.380、0.095、0.010、0.095,P=0.477、0.392

27、、0.827、0.954、0.995、0.636)。各組內(nèi)HIV RNA定量值HAART治療12個月時均較基線時降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=5.548、12.032、2.611,P＜0.001、P＜0.001、P=0.009)3組間相同時間點HIV RNA定量值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=1.875、0.433、1.059、1.619、1.614、1.710,P=0.061、0.665、0.290、0.106、0.107、0.087);

28、3組患者HAART治療前后體內(nèi)HIV RNA定量值均呈下降趨勢。B、C組間HCVRNA定量值相同時間點比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=0.550、1.147、0.488、0.194、1.219、0.147,P=0.582、0.251、0.625、0.846、0.233、0.883);2組患者HCV RNA定量值HAART治療12個月時與基線時比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=0.749、0.917,P=0.917、1.000);HAART治療前后2

29、組患者體內(nèi)HCV RNA均呈水平波動。C組患者HBV DNA定量值HAART治療1年時較基線時差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=0.602,P=0.690)。HAART治療前后C組患者體內(nèi)HBV DNA呈水平波動,病毒均呈低水平復(fù)制(102～105 capies/mL)。
　　 結(jié)論：
　　 1.經(jīng)血液途徑感染HIV-1人群合并HCV感染率顯著高于普通人群,合并顯性HBV感染率低于普通人群,這與既往報道一致。經(jīng)血液途徑感染HIV-1

30、人群中存在隱匿性HBV感染,隱匿性HBV感染率為29.78%。
　　 2.HIV人群合并OBI的主要影響因素為低CD4+T淋巴細(xì)胞計數(shù),年齡、性別、是否合并HCV感染對OBI的發(fā)生無影響。HCV感染及HCV RNA載量高低與OBI的發(fā)生無關(guān),但合并HCV感染加重HIV感染者的肝功能損害。合并OBI的HIV感染者易出現(xiàn)抗HBc陽性,易出現(xiàn)AST的升高。本研究中發(fā)現(xiàn)OBI患者中存在HBsAg“α”抗原決定簇P135F、N146K、C