龍眼肉多糖LGP50和LGP50S-1免疫調(diào)節(jié)及抗衰老作用研究.pdf

1、目的：本論文旨在研究龍眼肉多糖LGP50和LGP50S-1的免疫調(diào)節(jié)作用及LGP50的抗衰老活性，并初步探討其免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)制。
　　方法：采用MTT法評價LGP50和LGP50S-1對小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖及NK細(xì)胞殺傷活性的影響；ELISA法考察LGP50和LGP50S-1對脾淋巴細(xì)胞分泌IL-2的影響；Griess試劑檢測LGP50和LGP50S-1對巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO的影響；流式細(xì)胞術(shù)檢測LGP50S-1對小鼠脾淋巴細(xì)胞周期分

2、布的影響；Western blot法測定LGP50S-1對小鼠淋巴細(xì)胞MAPKs及NF-κB信號通路的影響；建立小鼠免疫抑制模型考察 LGP50對免疫抑制小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)和碳粒廓清能力的影響；采用D-gal誘導(dǎo)建立小鼠衰老模型評價LGP50的抗衰老活性。
　　結(jié)果：LGP50和LGP50S-1在25-400μg/ml濃度范圍能促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖，呈現(xiàn)濃度依賴性；在25-200μg/ml濃度范圍能促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞分泌IL-2，呈

3、濃度依賴性，當(dāng)濃度為200μg/ml時，脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)24 h和48 h后分泌IL-2的量分別達(dá)到36.57 pg/ml、26.31 pg/ml和176.76 pg/ml、69.46 pg/ml；LGP50能增強(qiáng)免疫抑制小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)，50、100、200 mg/kg劑量組與正常組比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　LGP50和LGP50S-1在25-400μg/ml濃度范圍可顯著增強(qiáng)NK細(xì)胞殺傷YAC-1細(xì)胞活力，當(dāng)濃度為400μg

4、/ml時殺傷率分別達(dá)到33.74％和51.08%；在3.1-400μg/ml濃度范圍內(nèi)可顯著促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分泌NO，當(dāng)濃度為200μg/ml，腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)24 h和48 h后產(chǎn)生的NO含量分別達(dá)到73.50μM、28.58μM和99.67μM、33.17μM；LGP50能增強(qiáng)免疫抑制小鼠碳粒廓清能力，50、100、200 mg/kg劑量組與正常組比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　LGP50S-1不同濃度均能促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞進(jìn)入S

5、期，當(dāng)濃度為100μg/ml時S期所占比例達(dá)到22.74%，高于陰性對照組的15.72%；且在濃度為100μg/ml時，脾淋巴細(xì)胞信號相關(guān)蛋白NF-κB和ERK1/2在0-3 h內(nèi)的磷酸化逐漸增強(qiáng)，呈現(xiàn)時間依賴性。
　　LGP50在劑量為100和200 mg/kg時可顯著提高D-gal誘導(dǎo)的衰老模型小鼠血清、肝、腦組織中CAT、SOD、GSH-Px的含量，降低MDA的含量。
　　結(jié)論：LGP50和LGP50S-1能通過提高小