高產(chǎn)脂肽優(yōu)良納豆菌的選育.pdf

1、環(huán)脂肽是由微生物產(chǎn)生的一類生物表面活性劑，它是由親水的肽環(huán)和親油的脂肪烴鏈兩部分組成。由于其獨(dú)特的化學(xué)組成和兩親型分子結(jié)構(gòu)，除具表面活性外，脂肽還具有抗真菌、抗細(xì)菌、抗病毒、抗腫瘤等生物活性，因而脂肽類在醫(yī)藥、食品、微生物采油、化妝品等領(lǐng)域有著很重要的應(yīng)用前景。 本研究利用脂肽類表面活性劑具有溶解血細(xì)胞，并且只有產(chǎn)生表面活性劑能夠乳化碳?xì)浠衔锏木瓴拍芪绽檬托纬墒捎桶叩壬飳W(xué)特性設(shè)計(jì)選育方案，采用血瓊脂平板與油平板相結(jié)合

2、的方法，從實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)存的10株納豆菌株中分離出了1株產(chǎn)脂肽的高產(chǎn)納豆菌菌株-NS-6，并以此為出發(fā)菌株，通過紫外線、微波和DES連續(xù)誘變處理，血平板或血瓊脂平板初篩和搖瓶發(fā)酵復(fù)篩相結(jié)合的方法，獲得了一株突變株-NS-64，其脂肽產(chǎn)量比誘變前提高了132.8％，在未經(jīng)優(yōu)化的搖瓶發(fā)酵條件下，脂肽的發(fā)酵得率由出發(fā)菌株的1.120g/L提高到2.607g/L。菌株經(jīng)多次傳代，遺傳性狀穩(wěn)定。 在單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，先用Placke

3、tt-Burman（PB）方法對(duì)影響菌株NS-64液體發(fā)酵培養(yǎng)基諸因素的效應(yīng)進(jìn)行評(píng)價(jià)，篩選出了三個(gè)影響較大的重要因素，分別為：蛋白胨、酵母粉、CaCl2，利用響應(yīng)面分析法（RSM）確定了它們的最佳工藝參數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，菌株NS-64發(fā)酵產(chǎn)脂肽的最佳培養(yǎng)基組成為：蛋白胨1.73％，蔗糖0.5％，酵母粉0.063％，MgSO4·7H2O8.0×10-4mol/L，磷源0.05mol/L（Na2HPO4·12H2O：KH2PO4=4：3，摩