shRNA沉默F(xiàn)AK基因抑制胃癌生長及轉(zhuǎn)移的體內(nèi)實驗研究.pdf

1、目的：
　　研究FAK基因沉默后裸鼠胃癌模型體內(nèi)腫瘤生長及轉(zhuǎn)移的變化。
　　方法：
　　培育SGC-7901細(xì)胞（空白對照組）；轉(zhuǎn)染FAK-shRNA慢病毒載體的SGC-7901細(xì)胞（干擾實驗組）；轉(zhuǎn)染陰性對照shRNA慢病毒載體的SGC-7901細(xì)胞（陰性對照組）；在G418濃度為600ug/ml的條件下篩選獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株；體外用Western Blot方法檢測三組細(xì)胞FAK蛋白的表達(dá)；將裸鼠隨機(jī)分為6組，采用

2、三組細(xì)胞反復(fù)傳代，接種到裸鼠體內(nèi)，各建立人胃癌裸鼠皮下移植模型和原位移植模型，觀察裸鼠體內(nèi)腫瘤生長及轉(zhuǎn)移情況；用RT-PCR，免疫組織化學(xué)染色檢測瘤體FAK的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.Western Blot檢測，干擾實驗組FAK蛋白較陰性對照組、空白對照組明顯減少。
　　2.裸鼠皮下移植腫瘤生長大小：干擾實驗組(1.474±0.9840g)與陰性對照組(3.134±0.3299g)、空白對照組(2.687±0.

3、3827)比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);陰性對照組和空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；裸鼠原位腫瘤模型體內(nèi)轉(zhuǎn)移情況：干擾實驗組肝臟轉(zhuǎn)移1只，無腹腔轉(zhuǎn)移；陰性對照組肝臟轉(zhuǎn)移6只，腹腔轉(zhuǎn)移4只；空白對照組肝臟轉(zhuǎn)移5只，腹腔轉(zhuǎn)移4只；干擾實驗組與陰性對照組和空白對照組有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。
　　3.瘤體RT-qPCR檢測，干擾實驗組FAK的mRNA明顯低于陰性對照組和空白對照組。
　　結(jié)論：
　　1.FAK-shRNA