shRNA抑制FAK表達(dá)治療胃癌轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:構(gòu)建FAK RNAi慢病毒載體，探討其對(duì)胃癌細(xì)胞增殖活性、侵襲及轉(zhuǎn)移能力影響，為胃癌新的基因療法提供依據(jù)。
　　 研究方法:
　　 1.構(gòu)建FAK RNAi慢病毒載體，通過綠色熒光蛋白報(bào)告基因GFP檢測轉(zhuǎn)基因效率。
　　 2.重組慢病毒感染胃癌細(xì)胞SGC7901，MTT法檢測FAK沉默對(duì)SGC7901細(xì)胞增殖的影響，并通過Western blot法檢測FAK干擾前后SGC7901細(xì)胞中FAK表達(dá)的變化。

2、r>　　 3.制備Transwell小室，檢測FAK沉默對(duì)SGC7901細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移能力的影響。
　　 結(jié)果:
　　 1.成功構(gòu)建了靶向FAK的RNAi慢病毒載體，其對(duì)胃癌細(xì)胞SGC7901細(xì)胞具有穩(wěn)定感染能力。
　　 2.MTT檢測并繪制細(xì)胞生長曲線，可見干擾組胃癌SGC7901與未處理組及陰性對(duì)照組相比，生長明顯抑制(P＜0.05)，未處理組及陰性對(duì)照組無明顯差別(P＞0.05)。Western blot

3、方法檢測FAK蛋白水平表達(dá)發(fā)現(xiàn)，干擾組胃癌SGC7901細(xì)胞較未處理組及陰性質(zhì)粒對(duì)照組，F(xiàn)AK的表達(dá)均明顯降低。
　　 3.體外侵襲與轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)：對(duì)比未處理組及陰性對(duì)照組細(xì)胞，干擾組細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移能力明顯下降(P＜0.05)，正常組及陰性對(duì)照組細(xì)胞之間無明顯差別(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.成功構(gòu)建FAK的RNAi慢病毒載體。
　　 2.重組慢病毒載體有效抑制感染胃癌SGC7901細(xì)胞增殖活性