5-HT-,2C-受體對人星型膠質(zhì)瘤U251細胞腦啡肽酶基因和蛋白表達的調(diào)控.pdf

1、阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease，AD）是一種進行性發(fā)展的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。目前研究認為β淀粉樣蛋白（amyloid-β protein，Aβ）的聚積，進而對神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞產(chǎn)生損害是AD發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié)。腦啡肽酶（neprilysin，NEP）是腦內(nèi)β淀粉樣蛋白降解的主要限速酶，提高AD患者腦內(nèi)NEP的表達量可促進β淀粉樣蛋白的分解。以往的研究表明，5-HT2C受體激動后增加淀粉樣蛋白前體蛋白（APP）向α分泌

2、酶方向的加工，那么是否會增加降解β淀粉樣蛋白的NEP的表達，尚未見報道。因此，本課題以人星型膠質(zhì)瘤細胞株U251作為實驗對象，探討5-HT2C受體對NEP基因轉錄和蛋白表達的調(diào)節(jié)作用，以期為AD的預防和治療奠定一定的理論基礎。 實驗采用RT-PCR，熒光定量RT-PCR和Western blot技術，分別從mRNA水平和蛋白水平檢測5-HT2C受體激動劑m-CPP，5-HT2C受體拮抗劑RS 102221對NEP的調(diào)控作用。

3、 應用濃度為10-8~10-5mol/L的特異性5-HT2C受體激動劑m-CPP處理U251細胞，可濃度、時間依賴性地促進NEP mRNA的表達，與未加藥物刺激的空白對照組相比有非常顯著的差異（p<0.01）。該促進作用可被特異性5-HT2C受體拮抗劑RS 102221所抑制，并通過繪制抑制曲線求得半數(shù)抑制濃度IC50 = 2.91 ×10-9 mol/L。同樣地，應用濃度為10-9~10-6 mol/L的m-CPP處理U251細胞