白藜蘆醇對人膀胱癌T24細胞的抑制作用及其機制研究.pdf

1、浙江大學醫(yī)學院博士學位論文白藜蘆醇對人膀胱癌T24細胞的抑制作用及其機制研究姓名：白宇申請學位級別：博士專業(yè)：外科學（泌尿外）指導教師：謝立平200803012008年浙江大學醫(yī)學院博士學位論文CyclinD1和CDK4的表達，并增強了WAF一1／p21蛋白的表達。第二部分白藜蘆醇對人膀胱癌T24細胞凋亡的影響目的研究白藜蘆醇在體外對人膀胱癌細胞系T24細胞凋亡的誘導作用，并探討其誘導凋亡的相關分子機制。方法采用流式細胞儀(PI和all

2、IlexinV雙染法)檢測T24細胞凋亡的變化。采用West鋤blo劬唱方法檢測不同濃度白藜蘆醇(O，50，100，150和200“M)作用24小時后，T24細胞中P13眥、ⅨⅨ1／2和p38三條信號通路的改變，同時研究了Bcl2家族、casp硒e一3和caSpase9等蛋白在白藜蘆醇作用后表達的變化。結果1不同濃度白藜蘆醇(O，50，100，150和200“M)作用于T24細胞24小時后能明顯誘導細胞凋亡，凋亡的誘導作用呈顯著劑量依賴

3、性。、2光學顯微鏡顯示不同濃度白藜蘆醇(0，50，100，150和200pM)作用于T24細胞24小時后使細胞密度呈劑量依賴性降低，細胞形態(tài)改變也呈劑量依賴性，同時觀察到凋亡細胞所具有的形態(tài)學改變。3通過流式細胞儀(PI和鋤neXinV雙染法)檢測發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇作用于T24細胞24小時后凋亡細胞數(shù)量呈劑量依賴性增加。白藜蘆醇(O200M)作用24小時后產(chǎn)生的早期凋亡細胞為40％141％；晚期凋亡細胞分別為26％367％，總的凋亡細胞為66

4、％475％。4白藜蘆醇(O一200pM)作用24小時后，隨著作用濃度的增加，T24細胞phosphoSer473Akt與phosphoERKl／2的表達逐漸降低，但tA虹與tERKl／2未見改變；phoSphop38表達逐漸增強，tp38表達未見改變，三種信號蛋白表達變化均呈顯著的濃度依賴性。5白藜蘆醇(0—200肛M)作用24小時后，隨著作用濃度的增加，T24細胞中Bcl2與BclXL的表達逐漸降低，而BaX表達逐漸增高，呈顯著的濃度