5-Aza-cdR增效絲裂霉素對(duì)膀胱癌T24細(xì)胞化療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、【目的】研究5-Aza-cdR增加絲裂霉素對(duì)膀胱癌T24細(xì)胞化療效果
　　【方法】絲裂霉素（0.005mg/ml、0.01mg/ml、0.05mg/ml）和5-Aza-cdR(0、0.25、0.5、1、5、10umol/L)處理膀胱癌T24細(xì)胞48小時(shí)，各組細(xì)胞均使用MTT檢測(cè)增殖，選取增殖抑制明顯的絲裂霉素濃度完成進(jìn)一步試驗(yàn)。用相同濃度的絲裂霉素（0.01mg/ml）和5-Aza-cdR(0、0.25、0.5、1、5、10umo

2、l/L)處理膀胱癌T24細(xì)胞48小時(shí)，1組為對(duì)照組（未加絲裂霉素和5-Aza-cdR），2組為僅加絲裂霉素0.01mg/ml，3-7組為不同濃度的5-Aza-cdR與絲裂霉素聯(lián)合使用。各組細(xì)胞均使用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)細(xì)胞凋亡，western blot檢測(cè)P-gp、MRP蛋白表達(dá)。所有試驗(yàn)結(jié)果均重復(fù)3次。
　　【結(jié)果】MTT檢測(cè) T24細(xì)胞增殖，與單用絲裂霉素組和合用不同濃度5-Aza-cdR的各組比較，兩藥合用對(duì)膀胱癌T24細(xì)胞的A值

3、差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）,相對(duì)抑制率IR％差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），兩藥合用對(duì)膀胱癌 T24細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制明顯提高，呈協(xié)同效應(yīng)且與5-Aza-cdR濃度有依賴性。不同濃度絲裂霉素與相同濃度5-Aza-cdR的各組比較，膀胱癌T24細(xì)胞的A值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），顯示絲裂霉素濃度也有依賴性。選取絲裂霉素濃度為0.01mg/ml，與不同濃度5-Aza-cdR培養(yǎng)48小時(shí)，用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)細(xì)胞凋亡，各組細(xì)胞

4、凋亡率分別為：3.23±0.08%、4.85±0.04%、8.81±0.06%、14.26±0.11%、21.14±0.05%、28.46±0.04%、38.17±0.07%，單用絲裂霉素組和合用不同濃度5-Aza-cdR的各組比較，細(xì)胞凋亡逐漸增加，各組與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。用Western Blot檢測(cè)P-gp蛋白，各樣本的IOD值為：451.71±0.08、416.27±0.09、315.42±0.17、21

5、4.03±0.14、174.71±0.23、80.519±0.14、38.322±0.19；檢測(cè) MRP各組 IOD值為：438.73±0.05、388.59±0.08、322.53±0.13、260.82±0.17、227.53±0.04、163.41±0.10、128.23±0.21。結(jié)果顯示各組細(xì)胞P-gp、MRP蛋白表達(dá)逐漸下降，各組與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　【結(jié)論】5-Aza-cdR與絲裂霉