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文檔簡(jiǎn)介
1、【目的】研究5-Aza-cdR增加絲裂霉素對(duì)膀胱癌T24細(xì)胞化療效果
【方法】絲裂霉素(0.005mg/ml、0.01mg/ml、0.05mg/ml)和5-Aza-cdR(0、0.25、0.5、1、5、10umol/L)處理膀胱癌T24細(xì)胞48小時(shí),各組細(xì)胞均使用MTT檢測(cè)增殖,選取增殖抑制明顯的絲裂霉素濃度完成進(jìn)一步試驗(yàn)。用相同濃度的絲裂霉素(0.01mg/ml)和5-Aza-cdR(0、0.25、0.5、1、5、10umo
2、l/L)處理膀胱癌T24細(xì)胞48小時(shí),1組為對(duì)照組(未加絲裂霉素和5-Aza-cdR),2組為僅加絲裂霉素0.01mg/ml,3-7組為不同濃度的5-Aza-cdR與絲裂霉素聯(lián)合使用。各組細(xì)胞均使用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,western blot檢測(cè)P-gp、MRP蛋白表達(dá)。所有試驗(yàn)結(jié)果均重復(fù)3次。
【結(jié)果】MTT檢測(cè) T24細(xì)胞增殖,與單用絲裂霉素組和合用不同濃度5-Aza-cdR的各組比較,兩藥合用對(duì)膀胱癌T24細(xì)胞的A值
3、差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),相對(duì)抑制率IR%差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),兩藥合用對(duì)膀胱癌 T24細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制明顯提高,呈協(xié)同效應(yīng)且與5-Aza-cdR濃度有依賴性。不同濃度絲裂霉素與相同濃度5-Aza-cdR的各組比較,膀胱癌T24細(xì)胞的A值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),顯示絲裂霉素濃度也有依賴性。選取絲裂霉素濃度為0.01mg/ml,與不同濃度5-Aza-cdR培養(yǎng)48小時(shí),用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,各組細(xì)胞
4、凋亡率分別為:3.23±0.08%、4.85±0.04%、8.81±0.06%、14.26±0.11%、21.14±0.05%、28.46±0.04%、38.17±0.07%,單用絲裂霉素組和合用不同濃度5-Aza-cdR的各組比較,細(xì)胞凋亡逐漸增加,各組與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。用Western Blot檢測(cè)P-gp蛋白,各樣本的IOD值為:451.71±0.08、416.27±0.09、315.42±0.17、21
5、4.03±0.14、174.71±0.23、80.519±0.14、38.322±0.19;檢測(cè) MRP各組 IOD值為:438.73±0.05、388.59±0.08、322.53±0.13、260.82±0.17、227.53±0.04、163.41±0.10、128.23±0.21。結(jié)果顯示各組細(xì)胞P-gp、MRP蛋白表達(dá)逐漸下降,各組與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
【結(jié)論】5-Aza-cdR與絲裂霉
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