5,7-二甲氧基黃酮對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　研究5,7-二甲氧基黃酮(5,7-dimethoxyflavone, DMF)是否具有抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用,并探討其作用機(jī)制是否涉及調(diào)節(jié)Bax/Bcl-2的比值。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞。 MTS比色法測(cè)定細(xì)胞活性。平皿集落形成法檢測(cè)細(xì)胞集落形成能力。Annexin V/PI雙染色流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry, FCM)定量分析細(xì)胞凋亡

2、率。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)測(cè)定細(xì)胞組蛋白/DNA碎片。間接免疫熒光標(biāo)記FCM技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　MTS比色法測(cè)定結(jié)果顯示:DMF以及先導(dǎo)化合物5,7-二羥基黃酮或稱(chēng)為白楊素(5,7-dihydroxyflavone, chrysin, ChR)作用24 h,顯著抑制SGC-7901細(xì)胞活性(P<0.05),

3、呈濃度依賴(lài)性。平皿集落形成法檢測(cè)結(jié)果證明:DMF明顯抑制SGC-7901細(xì)胞錨定依賴(lài)性生長(zhǎng)(P<0.05),呈濃度依賴(lài)性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)的集落形成抑制率分別為27％±4%、51%±8%和79%±11%;10.0μmol/L DMF的集落抑制率與30.0μmol/L ChR的集落抑制率(43%±7%)類(lèi)似。Annexin V/PI雙染色FCM分析結(jié)果表明:DMF顯著誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞凋亡(P<0.0

4、5),呈濃度依賴(lài)性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)孵育24 h,其細(xì)胞凋亡率分別是3.55%±0.39%、25.30%±1.71%和45.67%±2.90%;10.0μmol/L DMF的細(xì)胞凋亡率高于30.0μmol/L ChR的細(xì)胞凋亡率(7.50%±0.62%,P<0.05)。ELISA檢測(cè)細(xì)胞組蛋白/DNA碎片結(jié)果顯示:DMF誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞組蛋白/DNA碎片增加(P<0.05),呈濃度依賴(lài)性;DMF(

5、3.0、10.0、30.0μmol/L)處理24 h的細(xì)胞組蛋白/DNA碎片水平分別是溶媒對(duì)照組(0.1%DMSO,1.00)的1.80、5.23和8.19倍;30.0μmol/L ChR處理組的細(xì)胞組蛋白/DNA碎片水平為溶媒對(duì)照組3.46倍。間接免疫熒光標(biāo)記FCM技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn):DMF明顯上調(diào)Bax蛋白表達(dá)(P<0.05),呈濃度依賴(lài)性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)處理24 h的細(xì)胞Bax蛋白表達(dá)水平分別是溶媒對(duì)照

6、組(0.1% DMSO,1.00)的1.56、2.99和4.18倍;同時(shí),DMF明顯下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)(P<0.05),呈濃度依賴(lài)性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)處理24 h的細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)水平分別是溶媒對(duì)照組的0.55、0.38和0.16;據(jù)此推算, DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)處理24 h,SGC-7901細(xì)胞Bax/Bcl-2比值分別是2.83、7.86和26.13。