大鼠脊髓損傷后細(xì)胞自噬的表達(dá)及作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、蘇州大學(xué)博士學(xué)位論文大鼠脊髓損傷后細(xì)胞自噬的表達(dá)及作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：潘文明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：骨外科指導(dǎo)教師：唐天駟20100501中文摘要大鼠脊髓損傷后細(xì)胞自噬的表達(dá)及作用的實(shí)驗(yàn)研究和膠質(zhì)細(xì)胞中均可以發(fā)現(xiàn)自噬體，脊髓損傷后8H開(kāi)始，細(xì)胞自噬相關(guān)基因Beclinl，LC3B的mRNA表達(dá)即較對(duì)照組明顯升高，并且隨著時(shí)間持續(xù)升高，在傷后3D時(shí)達(dá)到高峰，一直到傷后21D均有表達(dá)，而自噬相關(guān)蛋白Beclinl，LC3B的表達(dá)和其mRNA

2、表達(dá)同步。結(jié)論：脊髓損傷后損傷區(qū)的神經(jīng)元細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞均有自噬性細(xì)胞死亡的表達(dá)，自噬相關(guān)基因Beclinl和LC3B從損傷后8H開(kāi)始即表達(dá)量升高，到3D時(shí)到達(dá)高峰，21D時(shí)仍然存在。自噬相關(guān)蛋白Beclinl和LC3B表達(dá)與基因表達(dá)同步，較對(duì)照組明顯升高。關(guān)鍵詞：脊髓損傷，細(xì)胞自噬，Bedim，LC3B第三部分自噬抑制劑3MA對(duì)大鼠脊髓損傷后神經(jīng)細(xì)胞自噬及凋亡的影響目的：研究自噬抑制劑3MA對(duì)大鼠脊髓損傷后自噬相關(guān)蛋白Beclinl和L

3、C3B表達(dá)的影響，同時(shí)評(píng)價(jià)3MA對(duì)大鼠脊髓損傷后細(xì)胞凋亡的影響。方法：將大鼠隨機(jī)分成三組：對(duì)照組，單純脊髓損傷組，3MA干預(yù)組，每組同樣分為傷后8H、1D、3D、7D、21D5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，使用熒光定量RTPCR方法檢測(cè)各組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)Beclinl和LC3B基因表達(dá)的變化，使用熒光免疫組織化學(xué)方法評(píng)價(jià)各組各時(shí)間點(diǎn)Beclinl和LC3B蛋白表達(dá)的變化，使用TUNEL法和脊髓組織的DNALadder比較各組脊髓損傷后細(xì)胞凋亡的程度，使用Wes

4、trenblot法檢測(cè)各組凋亡相關(guān)蛋白Bcl2和Bax的表達(dá)變化。結(jié)果：在我們觀測(cè)的的五個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，3MA組較單純脊髓損傷組Beclinl和LC3B的mRNA表達(dá)有明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P005)。3MA組的Beclinl和LC3B的蛋白表達(dá)也較單純損傷組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO05)。脊髓損傷后可檢測(cè)到明顯的細(xì)胞凋亡，3MA組的TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯大于單純損傷組，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P005)。3MA組脊髓組織的D