TNF-α或-和曲安奈德對(duì)色素上皮細(xì)胞衍生因子表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]: 探討腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)或/和曲安奈德(triamcinolone acetonide, TA)在蛋白質(zhì)水平對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞合成和分泌色素上皮細(xì)胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor, PEDF)的影響及其可能的信號(hào)傳導(dǎo)通路。 [方法]: 體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(cultured human

2、 retinal pigment epithelial cells-19, ARPE-19);培養(yǎng)液中加入TA,濃度分別為40μg·L-1、400μg·L-1、4000μg·L-1、4×104μg·L-1、4×105μg·L-1及4×106μg·L-1,干預(yù)12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)后MTT法檢測細(xì)胞增殖情況；TA以40μg·L-1、400μg·L-1、4000μg·L-1及4×104μg·L-1的濃度分別干預(yù)ARPE-19

3、細(xì)胞,作用12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí),用蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測培養(yǎng)液及胞漿中PEDF的表達(dá)量；以TNF-α(20ng·ml-1)、TA(400μg·L-1)分別和同時(shí)干預(yù)ARPE-19細(xì)胞,作用1小時(shí)、6小時(shí)、24小時(shí),用蛋白免疫印跡法檢測培養(yǎng)液及胞漿中PEDF的表達(dá)量,以及胞漿中磷酸化p38絲裂原活化蛋白激酶(phospho-p38 mitogen activated protein kinase, p-p3

4、8MAPK)的表達(dá)量。 [結(jié)論]:低濃度TA不影響RPE細(xì)胞的增殖,而當(dāng)濃度達(dá)到或高于4×105μg·L-1時(shí),TA能夠抑制RPE細(xì)胞的增殖；TNF-α能夠抑制RPE細(xì)胞合成和分泌PEDF蛋白,并且上調(diào)磷酸化p38MAPK蛋白的表達(dá)；TA能夠促進(jìn)RPE細(xì)胞合成和分泌PEDF蛋白,并且下調(diào)磷酸化p38MAPK蛋白的表達(dá)；TA能夠減弱TNF-α抑制RPE細(xì)胞合成和分泌PEDF蛋白以及上調(diào)磷酸化p38MAPK蛋白表達(dá)的作用。TNF-