內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在對比劑誘導(dǎo)的人腎小管上皮細胞凋亡中的作用及阿托伐他汀對其的保護作用.pdf

1、目的：
　　探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）在對比劑（CM）誘導(dǎo)人腎小管上皮細胞（HKC）凋亡中的作用及阿托伐他汀（ATO）對其的保護作用。
　　方法：
　　以HKC為研究對象，在ATO預(yù)處理及缺血缺氧條件下，將細胞株隨機分為六組：空白組、CM組（加入120mgI/mL碘普羅胺預(yù)處理2h）、抗凋亡劑N-乙酰半胱氨酸（NAC）組（加入10mmol/L NAC預(yù)處理2h，再加120mgI/mL碘普羅胺處理2h）、ATO低、中、高劑

2、量組（分別加入10-8、10-7、10-6mol/L的ATO預(yù)處理后再加120mgI/mL碘普羅胺處理2h），在預(yù)先設(shè)定的處理條件下將6組細胞進行培養(yǎng)。此后，用細胞計數(shù)試劑-8法（CCK-8）檢測細胞增殖情況，乳酸脫氫酶（LDH）檢測細胞損傷，全自動生化分析儀檢測細胞內(nèi)和培養(yǎng)液中髓過氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平，流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡，蛋白質(zhì)印跡法（Western Blot）檢測細胞中GPR78、C

3、HOP和caspase-12的蛋白表達水平，實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（real-time PCR）檢測細胞中GPR78、CHOP和caspase-12的mRNA表達水平。
　　結(jié)果：
　　CM可明顯降低細胞活性并造成正常HKC細胞和缺血缺氧HKC細胞的損傷，引起細胞內(nèi)MPO、MDA減少，細胞外SOD增多。ATO可提高細胞活性并減輕細胞損傷，引起細胞內(nèi)MPO、MDA增多，細胞外SOD減少。其中ATO對缺血缺氧HKC細胞的影響較

4、為明顯，且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。CM明顯增加了GPR78、CHOP和caspase-12的蛋白表達和細胞凋亡率，抗凋亡劑NAC明顯降低了caspase-12的表達和細胞凋亡率，但不能明顯降低對比劑誘導(dǎo)的GPR78和CHOP高表達。ATO預(yù)處理可降低GPR78、CHOP和caspase-12的表達，且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性，從而起到對HKC的保護作用。
　　結(jié)論：
　　在缺血缺氧條件下，CM誘導(dǎo)HKC細胞活性下降、凋亡，此作用可