GDNF在胰腺癌神經(jīng)侵襲中的作用初步探討.pdf

1、研究背景：胰腺癌是惡性度極高的惡性腫瘤之一，患者發(fā)現(xiàn)時(shí)多屬晚期，僅有10％-15％有手術(shù)切除的機(jī)會(huì)，5％-7.5％能根治。但是它術(shù)后復(fù)發(fā)率高，預(yù)后差，5年生存率僅為5％左右。胰腺癌主要是通過(guò)淋巴道、神經(jīng)及血液等途徑發(fā)生轉(zhuǎn)移。在各種轉(zhuǎn)移途徑中，神經(jīng)侵襲(Neuralinvasion，NI)在胰腺癌的患者中早期即可發(fā)生，并且發(fā)生率較高，被認(rèn)為是該腫瘤的特殊轉(zhuǎn)移途徑。由胰腺內(nèi)外的神經(jīng)組織產(chǎn)生的許多神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、粘附分子參與了胰腺癌的神經(jīng)侵襲過(guò)

2、程。其中膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)在胰腺癌神經(jīng)侵襲(NI)中的作用同益引起人們的重視。 目的：建立裸鼠原位胰腺癌模型，探討GDNF及其受體、MMP9與裸鼠原位胰腺癌動(dòng)物模型中神經(jīng)侵襲的關(guān)系。胰腺癌細(xì)胞培養(yǎng)，探討GDNF對(duì)胰腺癌細(xì)胞的化學(xué)趨化作用和增殖的影響。研究探討GDNF對(duì)于MMP-9表達(dá)的影響。 方法：利用胰腺癌細(xì)胞系MIAPaCa-2和Capan-2建立裸鼠原位胰腺癌模型，通過(guò)大體標(biāo)本觀察、HE染色及免疫組

3、化染色，探討GDNF及其受體、MMP9與動(dòng)物模型中神經(jīng)侵襲的關(guān)系。胰腺癌細(xì)胞培養(yǎng)，利用trans-well小室、細(xì)胞計(jì)數(shù)、MTT和流式細(xì)胞法測(cè)定GDNF對(duì)胰腺癌細(xì)胞的趨化作用和增殖的影響。用RT-PCR、Elisa方法測(cè)定GDNF對(duì)于MMF-9表達(dá)的影響。 結(jié)果：胰腺癌具有神經(jīng)侵襲的傾向，胰腺癌在疾病早期，其他轉(zhuǎn)移無(wú)或很少時(shí)即有神經(jīng)侵襲的發(fā)生。GDNF及其受體RET的表達(dá)與胰腺癌神經(jīng)侵襲有關(guān)。培養(yǎng)體系中加入不同濃度GDNF，胰腺

4、癌細(xì)胞增殖明顯增強(qiáng)，Trans-well中胰腺癌細(xì)胞透壁數(shù)目明顯增多并且呈劑量依賴關(guān)系。培養(yǎng)體系中加入GDNF，胰腺癌細(xì)胞MMP-9mRNA表達(dá)增強(qiáng)，培養(yǎng)介質(zhì)中MMP-9蛋白的表達(dá)明顯增高。 結(jié)論：(1).胰腺癌具有神經(jīng)侵襲的傾向，在疾病早期即有神經(jīng)侵襲的發(fā)生，GDNF及其受體RET的表達(dá)與胰腺癌神經(jīng)侵襲有關(guān)。(2).GDNF對(duì)于胰腺癌細(xì)胞具有化學(xué)趨化和促增殖作用。(3).GDNF具有上調(diào)胰腺癌細(xì)胞MMP-9表達(dá)的作用，從而增強(qiáng)