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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:檢測(cè)NFκB、CXCR4在腎癌中表達(dá)情況以及NFκB的變化對(duì)CXCR4表達(dá)的影響,了解NFκB與CXCR4在腎癌發(fā)生和進(jìn)展過程中的意義并進(jìn)一步明確NFκB在腎癌的器官定向轉(zhuǎn)移中的作用。
方法:研究中,通過腎癌組織標(biāo)本免疫組織化學(xué)檢測(cè)與786-0腎癌細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)兩部分逐步探討NFκB與CXCR4在腎癌進(jìn)展與轉(zhuǎn)移過程中的影響。
1.運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)43例腎癌組織和21例癌旁組織標(biāo)本中p65/NFκB
2、和CXCR4陽(yáng)性表達(dá)情況,分析兩者與臨床、病理參數(shù)的聯(lián)系以及兩者之間的相關(guān)性。
2.將786-0腎癌細(xì)胞分成三組并作不同處理。Ⅰ組腎癌細(xì)胞用IL-1β刺激三個(gè)時(shí)段(4、8、12小時(shí));Ⅱ組腎癌786-0細(xì)胞用PDTC阻斷24h后加用IL-1β刺激,方法同Ⅰ組;無處理者為對(duì)照組。應(yīng)用細(xì)胞免疫組織化學(xué)(IMC)和半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)等方法檢測(cè)三組腎癌細(xì)胞中P65(NFκB)和CXCR4在蛋白和基因水平的表
3、達(dá),觀察Ⅰ與Ⅱ組癌細(xì)胞中P65(NFκB)和CXCR4表達(dá)的變化趨勢(shì)以及與對(duì)照組的差異。
結(jié)果:
1.P65/NFκB在腎癌和癌旁組織中表達(dá)率為76.7%(33/43)和47.6%(10/21),兩者存在明顯差異性(P<0.05)。CXCR4在癌組織和癌旁組織中陽(yáng)性率分別為67.4%(29/43)和33.3%(7/21),兩者存在明顯差異性(P<0.05)。同時(shí),P65與CXCR4的表達(dá)與腎癌的進(jìn)展有關(guān)(P<
4、0.05),而與腎癌的病理分級(jí),患者年齡、性別無關(guān)(P>0.05)。P65與CXCR4在腎癌中的表達(dá)之間存在一定相關(guān)性(r=0.44)。
2.Ⅰ組腎癌細(xì)胞中,P65(NFκB)蛋白表達(dá)隨IL-1β作用時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng),8和12小時(shí)兩時(shí)段較對(duì)照組明顯上升(P<0.01,0.01)。胞核陽(yáng)性P65(NFκB)表達(dá)率上升,12小時(shí)時(shí)段明顯高于對(duì)照組(P1<0.05)。P65(NFκB)mRNA表達(dá)在各時(shí)段間無明顯差異;同時(shí),CXC
5、R4蛋白表達(dá)隨IL-1β作用時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng),8和12小時(shí)兩時(shí)段與對(duì)照組比較有顯著差異(P<0.05,0.01),CXCR4mRNA也呈相同表達(dá)趨勢(shì),8和12小時(shí)兩時(shí)段與對(duì)照組比較有差異性(P<0.05,0.01)。Ⅱ組中,P65(NFκB)蛋白和mRNA表達(dá)均明顯減弱,與對(duì)照組比較有顯著差異(P<0.01,0.01)。P65胞核表達(dá)不明顯。CXCR4蛋白和mRNA表達(dá)減弱,與對(duì)照組比較有明顯差異(P<0.01,0.05)。
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