枯否細(xì)胞封閉對內(nèi)毒素誘導(dǎo)激活絲裂原活化蛋白激酶的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:內(nèi)毒素通過激活肝臟枯否細(xì)胞(Kupffer cells,KCs)絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinases,MAPK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,使其大量分泌釋放TNF-α等促炎細(xì)胞因子,從而導(dǎo)致肝損傷發(fā)生.GdCl<,3>可通過抑制枯否細(xì)胞活化,減輕或抑制LPS所致肝損傷,但封閉KCs是否可通過調(diào)節(jié)其MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,實現(xiàn)肝臟保護(hù)作用的機(jī)制尚未闡明.為此該實驗利用小鼠內(nèi)毒素血癥模型,探討KCs封

2、閉對LPS誘導(dǎo)MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響.方法:Ⅰ雄性昆明種小鼠在注射LPS(5mg/kg)前48h、24h,分別靜脈注射GdCl<,3>(10mg/kg)或等量的生理鹽水,于LPS或生理鹽水注射后30min,分別取出肝臟或分離KCs,檢測肝臟或KCs ERK1/2、p38MAPK蛋白表達(dá)及磷酸化水平;Ⅱ體外培養(yǎng)小鼠KCs經(jīng)GdCl<,3>(100μM)預(yù)處理1h,加入含LPS(100ng/ml)的DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)孵育30min,分別

3、檢測體外培養(yǎng)KCs ERK1/2、p38MAPK蛋白表達(dá)及磷酸化水平和GdCl<,3>對其吞噬、分泌功能的影響.結(jié)果:LPS可促進(jìn)肝臟或KCs ERK1/2、p38MAPK蛋白磷酸化,但對ERK1/2、p38MAPK蛋白表達(dá)無明顯影響.GdCl<,3>可抑制LPS誘導(dǎo)KCs活化和TNF-α分泌,但不能抑制LPS誘導(dǎo)KCs或肝臟ERK1/2、p38MAPK磷酸化,也不能影響ERK1/2、p38MAPK蛋白表達(dá),KCs經(jīng)GdCl<,3>單獨

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