p38絲裂原活化蛋白激酶作用蛋白質(zhì)的篩選、鑒定與初步研究.pdf

1、絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信號(hào)系統(tǒng)是細(xì)胞內(nèi)主要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),擔(dān)負(fù)著將細(xì)胞外各種有絲分裂和應(yīng)急信號(hào)傳遞至細(xì)胞核,并調(diào)節(jié)細(xì)胞基因表達(dá)介導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生反應(yīng)的重要使命.p38MAPK通路是MAPK信號(hào)系統(tǒng)的重要分支.該文通過研究休克模型信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中與p38激酶結(jié)合的蛋白質(zhì)群,深入地認(rèn)知p38激酶的相互作用分子,發(fā)現(xiàn)了與p38信號(hào)分子有結(jié)合關(guān)系的CRP,并證實(shí)了二者在體內(nèi)、外發(fā)

2、生相互作用,為進(jìn)一步闡明休克等重大疾病的發(fā)病機(jī)制,篩選其治療藥物提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).該課題是目前國際上首次在體研究p38激酶的結(jié)合蛋白質(zhì)群,包括其在不同動(dòng)物模型、不同組織的差異表達(dá),因而其生物學(xué)意義更為重大.這種策略具有以下傳統(tǒng)研究方法不能比擬的優(yōu)點(diǎn):(1)對擬研究的傳導(dǎo)對象不作任何假設(shè),可以同時(shí)鑒定同一因子引發(fā)的信號(hào)通路中所有與p38產(chǎn)生相互作用的蛋白質(zhì).而western-blot等傳統(tǒng)手段每次僅能對一種蛋白進(jìn)行鑒定.因此,這種策略是不存在

3、偏見的,沒有對信號(hào)傳導(dǎo)分子進(jìn)行預(yù)測.這樣有利于我們發(fā)現(xiàn)可能與p38激酶結(jié)合的新蛋白或者新關(guān)系.(2)應(yīng)用免疫共沉淀技術(shù)縮小了研究范圍,鎖定研究組織蛋白中與p38激酶結(jié)合的蛋白質(zhì)群,從而提高我們的研究效率.(3)生物質(zhì)譜還可在上述試驗(yàn)的同時(shí)對蛋白質(zhì)磷酸化位點(diǎn)進(jìn)行鑒定,拓展了深入研究的思路和可能性.(4)將幾種技術(shù)手段有效結(jié)合,有利于其他相關(guān)試驗(yàn)的研究,并可能催生新項(xiàng)目的產(chǎn)生.而CRP的功能及其在休克發(fā)生過程p38信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制中的作用有待進(jìn)