PI3K-AKT-GSK3β信號(hào)傳導(dǎo)通路在化療藥物誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡中的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文PI3KAKTGSK3β信號(hào)傳導(dǎo)通路在化療藥物誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡中的實(shí)驗(yàn)研究姓名：宋曉紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：馬丁20090501華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文3可抑制紫杉醇導(dǎo)致的細(xì)胞核形態(tài)學(xué)變化；蛋白質(zhì)印跡結(jié)果顯示，LiCl可抑制Caspase9和Caspase3的分子剪切，從而抑制凋亡的發(fā)生。3、3、線粒體跨膜電位指示劑JC1染色結(jié)果顯示，抑制劑LiCl可維持卵巢癌細(xì)胞O

2、V2008線粒體的極化狀態(tài)下紅綠熒光的強(qiáng)度，阻抑紫杉醇誘導(dǎo)的線粒體去極化所導(dǎo)致的紅色熒光減弱。4、細(xì)胞免疫熒光和線粒體提取試劑盒提取各組卵巢癌細(xì)胞線粒體后的蛋白質(zhì)印跡結(jié)果顯示，抑制劑LiCl可抑制紫杉醇導(dǎo)致的Bax蛋白的線粒體轉(zhuǎn)位，并且抑制紫杉醇誘導(dǎo)的抗凋亡分子Bcl2、Bclxl和Mcl1的降解，上調(diào)其表達(dá)。5、流式細(xì)胞儀周期分析顯示，紫杉醇作用后可引起明顯的G2M期阻滯（69.33%），而LiCl預(yù)孵育的細(xì)胞G2M期阻滯明顯增加（8

3、8.13%），紫杉醇與PI3K抑制劑LY294002（20μM）合用后則可明顯降低其G2M期阻滯（44.06%）。6、蛋白質(zhì)印跡結(jié)果顯示，應(yīng)用RNA干擾降低AKT2表達(dá)或應(yīng)用LY294002降低AKT活性均可增強(qiáng)紫杉醇誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞凋亡。結(jié)論結(jié)論1、GSK3β高水平磷酸化可抑制紫杉醇誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞凋亡。2、磷酸化GSK3β可抑制紫杉醇誘導(dǎo)的Bax蛋白的線粒體轉(zhuǎn)位和抗凋亡分子Bcl2、Bclxl和Mcl1的降解，從而維持線粒體的穩(wěn)定，

4、抑制凋亡。3、GSK3β可通過調(diào)節(jié)CyclinB1和CDC2影響紫杉醇誘導(dǎo)的G2M期阻滯。第二部分PI3KAKTGSK3β信號(hào)通路在順鉑誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡中作用的研究第二部分PI3KAKTGSK3β信號(hào)通路在順鉑誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡中作用的研究目的目的探討增加GSK3β的磷酸化狀態(tài)在順鉑誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞凋亡中的作用。方法方法運(yùn)用GSK3β特異性抑制劑LiCl增加GSK3β磷酸化水平，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)濃度梯度增加的順鉑誘導(dǎo)的兩株卵巢癌細(xì)胞