乙醛脫氫酶2活性水平及基因型與冠心病的相關(guān)性研究.pdf

1、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(coronary atherosclerotic heart disease，CAD)是指冠狀動(dòng)脈粥樣硬化使血管腔狹窄或阻塞，導(dǎo)致心肌缺血、缺氧而引起的心臟病，它和冠狀動(dòng)脈功能性改變（痙攣）一起，統(tǒng)稱冠狀動(dòng)脈性心臟病，簡(jiǎn)稱冠心?。╟oronary heart disease，CHD）。冠心病是威脅人類健康、影響生活質(zhì)量的常見疾病。目前，有研究顯示乙醛脫氫酶2(aldehyde dehydrogenase 2，A

2、LDH2)不僅是酒精代謝過程中的關(guān)鍵酶，而且是體內(nèi)重要的抗氧化應(yīng)激分子，可減少乙醛及其他脂肪族醛的細(xì)胞毒性，對(duì)心臟有保護(hù)作用。
　　 ALDH2由ALDH2基因編碼，有學(xué)者認(rèn)為ALDH2基因參與了冠心病的發(fā)生與發(fā)展。ALDH2基因具有單核苷酸多態(tài)性，其中研究最多的是Glu504Lys多態(tài)性位點(diǎn)（又稱rs671），該位點(diǎn)發(fā)生堿基置換，即鳥嘌呤（G，野生型）被腺嘌呤（A，突變型）替代。所以，ALDH2有兩個(gè)等位基因:G等位基因（AL

3、DH2*1）和A等位基因（ALDH2*2），導(dǎo)致人群中該酶基因型有3種情況:野生純合型（GG型又稱ALDH2*1/*1）、突變雜合型（GA型又稱ALDH2*1/*2）和突變純合型（AA型又稱ALDH2*2/*2）。日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)ALDH2突變基因型是日本男性心肌梗死(myocardial infarction，MI)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　 硝酸酯類藥物是心血管領(lǐng)域中應(yīng)用較早且應(yīng)用較廣泛的藥物，但是硝酸酯類藥物的生物轉(zhuǎn)化機(jī)制仍未被完

4、全闡明。最近，研究人員發(fā)現(xiàn)ALDH2對(duì)硝酸甘油發(fā)揮臨床療效具有一定影響，但是關(guān)于ALDH2不同基因型患者與硝酸酯類藥物尤其是單硝酸異山梨酯治療心絞痛臨床療效之間的研究相對(duì)較少。
　　 本研究擬從ALDH2活性水平及基因型方面，探討ALDH2與冠心病特別是心肌梗死的相關(guān)性，以及ALDH2不同基因型患者臨床應(yīng)用硝酸甘油和單硝酸異山梨酯有效性之間的關(guān)系，為冠心病臨床評(píng)估、發(fā)病機(jī)制以及藥物治療提供一定的理論依據(jù)和新的思路。
　　

5、 第一部分乙醛脫氫酶2活性水平與冠心病的相關(guān)性研究
　　 目的:探討乙醛脫氫酶2活性水平與冠心病之間的關(guān)系。
　　 方法:選擇2011年1月至2012年12月在唐山工人醫(yī)院心內(nèi)科住院的患者共191例，其中心絞痛患者62例，急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)患者64例，對(duì)照者65例。記錄所有研究對(duì)象臨床基本資料，包括:年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓病史和糖尿病病史，測(cè)量受試對(duì)

6、象身高(Height，H)、體重(Weight，W)，計(jì)算體重指數(shù)(body mass index，BMI)。入選研究對(duì)象于入院第二天清晨采集外周靜脈血，采用血液ALDH2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒檢測(cè)ALDH2活性水平;同時(shí)采用酶法測(cè)定總膽固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglycerides，TG)、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C

7、）和低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)。采用SPSS16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，對(duì)三組患者臨床基本資料、ALDH2活性水平進(jìn)行比較，采用相關(guān)分析分析血漿ALDH2活性水平與BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C水平的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:
　　 (1)對(duì)照組、心絞痛組、AMI組ALDH2活性水平分別為（23.76±6.31）U/L、（22.37±6.

8、03）U/L、（21.14±5.76）U/L，三組活性水平依次降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 (2)相關(guān)分析顯示對(duì)照組、心絞痛組、AMI組ALDH2水平與BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C水平均無相關(guān)性(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:對(duì)照組、心絞痛組和AMI組ALDH2活性水平依次下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，ALDH2水平與BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C水平無相關(guān)性，提示ALDH2活性

9、水平與冠心病病情嚴(yán)重程度無關(guān)，ALDH2不能作為判斷冠心病病情嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)指標(biāo)。
　　 第二部分乙醛脫氫酶2基因型與急性心肌梗死的相關(guān)性研究
　　 目的:探討乙醛脫氫酶2基因型與急性心肌梗死之間的相關(guān)性。
　　 方法:選擇2011年1月至2012年12月在唐山工人醫(yī)院心內(nèi)科住院診斷為急性心肌梗死(AMI)患者210例和對(duì)照者221例。記錄所有研究對(duì)象臨床基本資料，包括:年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓病史和糖

10、尿病病史，測(cè)量受試對(duì)象身高(H)、體重(W)，計(jì)算體重指數(shù)(BMI)。采用酶法測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。采集所有受試者外周靜脈血提取基因組DNA，采用測(cè)序方法檢測(cè)ALDH2基因Glu504Lys位點(diǎn)多態(tài)性。所有入選患者均進(jìn)行冠狀動(dòng)脈造影檢查，根據(jù)病變累及支數(shù)，分為單支病變、雙支病變和三支病變。采用SPSS16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，對(duì)AMI組和對(duì)照組臨床基本

11、資料、基因型頻率和等位基因頻率進(jìn)行比較，并進(jìn)一步對(duì)研究人群的飲酒情況和年齡情況進(jìn)行分層分析，采用多因素Logistic回歸分析判斷疾病危險(xiǎn)因素作用的大小，計(jì)算比數(shù)比(Odds Ratio，OR)和95％可信區(qū)間(95％ Confidence Index，95％CI)。
　　 結(jié)果:
　　 (1) AMI組和對(duì)照組ALDH2基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡。
　　 (2) AMI組GG、GA、AA基

12、因型頻率分別為:50.48％、43.81％、5.71％，對(duì)照組GG、GA、AA基因型頻率分別為:69.68％、28.05％、2.26％，兩組基因型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.001)。AMI組G等位基因頻率低于對(duì)照組(72.38％vs.83.71％)，A等位基因頻率高于對(duì)照組(27.62％vs.16.29％)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 (3)以有無AMI為因變量，將年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓病史

13、、糖尿病病史、BMI、TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALDH2基因型引入Logistic回歸模型，多因素Logistic回歸分析顯示ALDH2 GA+AA突變基因型是AMI的危險(xiǎn)因素（OR=1.300，95％CI:1.035-1.634，p=0.0243）。
　　 (4) AMI組ALDH2不同基因型與冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)無明顯相關(guān)性(p＞0.05)。
　　 (5)根據(jù)研究人群的飲酒情況進(jìn)行分層分析，在非飲酒人群中多因

14、素Logistic回歸分析顯示，GA+AA突變基因型是AMI的危險(xiǎn)因素（OR=1.791，95％CI:1.005-3.189，p=0.048）;在飲酒人群中Logistic回歸分析顯示，GA+AA突變基因型不是AMI的危險(xiǎn)因素(OR=1.041，95％CI:0.974-1.113, p=0.2327)。
　　 (6)根據(jù)研究人群的年齡進(jìn)行分層分析，多因素Logistic回歸分析顯示，在早發(fā)人群（男性＜55歲，女性＜65歲）中未發(fā)

15、現(xiàn)攜帶GA+AA突變基因型個(gè)體患AMI的風(fēng)險(xiǎn)增加(OR=1.030，95％CI:0.983-1.079，p=0.2097)，提示ALDH2 GA+AA突變基因型不是早發(fā)AMI的危險(xiǎn)因素;在晚發(fā)人群（男性≥55歲，女性≥65歲）中發(fā)現(xiàn)攜帶GA+AA突變基因型個(gè)體患AMI的風(fēng)險(xiǎn)增加（OR=1.424，95％CI:1.029-1.969，p=0.0329）。
　　 結(jié)論:
　　 (1) ALDH2 GA+AA突變基因型是AMI

16、的危險(xiǎn)因素。
　　 (2) AMI患者ALDH2基因型與冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)無相關(guān)性。
　　 (3)分層分析顯示，ALDH2 GA+AA突變基因型是非飲酒人群AMI的危險(xiǎn)因素，而不是飲酒人群AMI的危險(xiǎn)因素;ALDH2 GA+AA突變基因型是晚發(fā)AMI的危險(xiǎn)因素，而不是早發(fā)AMI的危險(xiǎn)因素。
　　 第三部分乙醛脫氫酶2不同基因型心絞痛患者應(yīng)用硝酸甘油和單硝酸異山梨酯臨床療效的相關(guān)性研究
　　 目的:探討乙醛脫

17、氫酶2不同基因型心絞痛患者應(yīng)用硝酸甘油和單硝酸異山梨酯臨床療效之間的關(guān)系。
　　 方法:選擇2011年1月至2012年12月在唐山工人醫(yī)院心內(nèi)科住院診斷為冠心病心絞痛患者395例，將患者隨機(jī)分為2組，硝酸甘油組201例，單硝酸異山梨酯組194例，記錄所有研究對(duì)象臨床基本資料，包括:年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓病史和糖尿病病史等，測(cè)量受試對(duì)象身高(H)、體重(W)，計(jì)算體重指數(shù)(BMI)。采用酶法測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三

18、酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。采集所有受試者外周靜脈血提取基因組DNA，采用測(cè)序方法檢測(cè)ALDH2基因Glu504Lys位點(diǎn)多態(tài)性。所有研究對(duì)象用藥期間，定期做心電圖及肝腎功能檢查，觀察兩組內(nèi)不同基因型患者心絞痛發(fā)作頻率、程度、持續(xù)時(shí)間，對(duì)比靜息心電圖ST-T變化，并記錄用藥期間不良反應(yīng)的發(fā)生情況，比較不同患者的臨床癥狀療效和心電圖療效。
　　 結(jié)果:
　　 (1)硝酸甘

19、油組和單硝酸異山梨酯組ALDH2基因型分布無明顯差異(p＞0.05)。
　　 (2)應(yīng)用硝酸甘油的臨床癥狀療效:ALDH2 GG野生基因型患者顯效40例，有效55例，無效40例;ALDH2 GA+AA突變基因型患者顯效17例，有效20例，無效29例。GG野生基因型患者、GA+AA突變基因型患者應(yīng)用硝酸甘油的臨床癥狀療效差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 應(yīng)用硝酸甘油的心電圖療效:ALDH2 GG野生基因型患者顯效2

20、8例，有效56例，無效51例;ALDH2 GA+AA突變基因型患者顯效10例，有效21例，無效35例。GG野生基因型患者、GA+AA突變基因型患者應(yīng)用硝酸甘油的心電圖療效差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 (3)應(yīng)用單硝酸異山梨酯的臨床癥狀療效:ALDH2 GG野生基因型患者顯效47例，有效73例，無效12例;ALDH2 GA+AA突變基因型患者顯效20例，有效31例，無效11例。GG野生基因型患者、GA+AA突變基因型患

21、者應(yīng)用單硝酸異山梨酯的臨床癥狀療效差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 應(yīng)用單硝酸異山梨酯的心電圖療效:ALDH2 GG野生基因型患者顯效41例，有效67例，無效24例;ALDH2 GA+AA突變基因型患者顯效18例，有效26例，無效18例。GG野生基因型患者、GA+AA突變基因型患者應(yīng)用單硝酸異山梨酯的心電圖療效差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 (4) ALDH2 GG野生基因型患者應(yīng)用單硝酸異山梨酯治療心

22、絞痛的臨床癥狀療效、心電圖療效優(yōu)于硝酸甘油，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);ALDH2 GA+AA突變基因型患者應(yīng)用單硝酸異山梨酯治療心絞痛的臨床癥狀療效、心電圖療效也優(yōu)于硝酸甘油，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(p＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 (1) ALDH2 GG野生基因型患者與GA+AA突變基因型患者應(yīng)用硝酸甘油治療心絞痛的臨床療效無差異。
　　 (2) ALDH2 GG野生基因型患者與GA+AA突變基因型患