血清雌二醇酶聯(lián)免疫檢測法對母馬早期妊娠診斷方法的研究.pdf

1、母馬平均發(fā)情周期為21天，隨著卵泡生長，雌二醇(E<,2>)分泌逐漸增多。在上次排卵第19～20天時(shí)，E<,2>達(dá)到高峰。發(fā)情排卵后，E<,2>恢復(fù)較低水平。母馬配種0～35天，若妊娠，雌激素含量下降，與空懷母馬間情期相似。若未妊娠，則進(jìn)入下一發(fā)情周期。血清雌二醇在21天內(nèi)再次逐漸升高并達(dá)峰值。因此，在配種后的下一個(gè)發(fā)情周期內(nèi)，妊娠與未妊娠母馬會出現(xiàn)血清雌二醇濃度的差異。本試驗(yàn)結(jié)合此特點(diǎn)，嘗試在配種21天內(nèi)，通過檢測雌二醇濃度差異，建立

2、更快捷、方便、安全、準(zhǔn)確的母馬早期妊娠診斷方法。 試驗(yàn)通過制備抗體，確定將母馬血清雌二醇單克隆抗體酶聯(lián)免疫法作為母馬血清雌二醇的檢測方法，其方法的線性范圍為10～1000pg/ml，計(jì)算得最低檢測限為20.46pg/ml。 通過建立好的酶免方法，檢測16匹配種后10～21天內(nèi)的母馬血清雌二醇激素濃度。結(jié)合直檢和超聲波診斷方法，確定其中8匹妊娠，剩余8匹未妊娠。發(fā)現(xiàn)妊娠母馬在配種后21天內(nèi)血清雌二醇濃度保持較低水平，平均濃

3、度為31.56±0.40pg/ml，最高值為48.3pg/ml。而未妊娠母馬則在配種后10～21日內(nèi)血清雌二醇水平緩慢升高，尤其在配種后16～21日內(nèi)，雌二醇濃度達(dá)到峰值，其平均濃度為52.64±1.70p/ml，與妊娠母馬血清雌二醇水平存在明顯差異(P<0.01)。 以上結(jié)果發(fā)現(xiàn)。在配種后16天開始，隔日檢測三次血清雌二醇濃度。當(dāng)三次檢測濃度值均低于臨界值48.3pg/ml時(shí)，即可判定母馬妊娠。此方法節(jié)省時(shí)間和勞動力，在采血后