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1、目的:吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol,I3C)是十字花科蔬菜中一種主要有效植物化學(xué)物質(zhì),具有防癌和抗癌作用。本研究旨在觀察吲哚-3-甲醇對(duì)肺癌細(xì)胞的抗腫瘤作用及其對(duì)EGFR不同表達(dá)水平的肺癌細(xì)胞放射敏感性的影響。
方法:采用MTT比色法檢測(cè)肺癌細(xì)胞NCI-H1975、NCI-H226和NCI-H520的細(xì)胞存活率;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期的改變;克隆形成實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)I3C對(duì)肺癌細(xì)胞放射敏感性的影響;siRNA
2、轉(zhuǎn)染方法降低肺癌細(xì)胞中EGFR蛋白表達(dá)水平;Westernblot法檢測(cè)EGFR蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:I3C對(duì)肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)有一定的劑量依賴性的抑制作用,24小時(shí)的藥物敏感性為:NCI-H520>NCI-H1975>NCI-H226;流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示不同濃度I3C可誘導(dǎo)劑量依賴性的不同細(xì)胞的不同細(xì)胞周期的阻滯,其中G2/M期阻滯明顯;采用無(wú)明顯毒副作用的5μmol/L濃度的I3C預(yù)處理明顯降低了EGFR表達(dá)陽(yáng)性的人肺腺癌NCI
3、-H1975和人肺鱗癌NCI-H226細(xì)胞對(duì)γ-射線照射的放射敏感性。I3C對(duì)EGFR表達(dá)陰性的人肺鱗癌NCI-H520細(xì)胞的放射敏感性則影響很小。Westernblot結(jié)果顯示I3C可以增加H1975和H226細(xì)胞中的EGFR蛋白表達(dá)水平。采用EGFRsiRNA轉(zhuǎn)染方法降低H1975細(xì)胞中EGFR蛋白的表達(dá),增加了細(xì)胞的放射敏感性,但抑制了I3C導(dǎo)致的細(xì)胞耐輻射效應(yīng)。
結(jié)論:這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明I3C具有劑量依賴性生長(zhǎng)抑制作用,
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